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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供人張氏肝細(xì)胞；Chang liver
的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱  人張氏肝細(xì)胞；Chang liver  
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞樣  
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)  
特征特性   張氏肝細(xì)胞1954年從非惡性的人體組織中建立。廣泛應(yīng)用于病毒學(xué)、生化和惡性腫瘤相關(guān)的轉(zhuǎn)移研究。   
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%  
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。  
傳代情況  PN5  
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO  
支原體檢測(cè)  陰性　  
STR    
同工酶    
染色體    

使用權(quán)限  A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

運(yùn)輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺(tái)棄去上清，加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。  
小鼠畸胎瘤細(xì)胞  
細(xì)胞介紹  
加拿大渥太華大學(xué)的Mc Burney 等在1982 年從雄性小鼠畸胎瘤中分離得到的 , 是一種能夠在體外培養(yǎng)的多能干細(xì)胞, P19 細(xì)胞團(tuán)經(jīng)RA 誘導(dǎo)可分化成神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞和纖維母細(xì)胞; 而經(jīng)二甲基亞砜(DM SO ) 誘導(dǎo)則分化成心肌、骨骼肌和平滑肌細(xì)胞;在P19細(xì)胞向神經(jīng)元分化的過(guò)程中，神經(jīng)發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)模式基本模擬了正常小鼠神經(jīng)發(fā)育過(guò)程, 因此, P19 目前被用作一個(gè)研究神經(jīng)發(fā)育的體外模型。P19 細(xì)胞作為研究神經(jīng)分化機(jī)制的模型, 顯著區(qū)別于其他細(xì)胞系的四大特點(diǎn)是: ①它具有正常小鼠的二倍體核型, 細(xì)胞分裂快, 可在體外迅速大量擴(kuò)增, 多次傳代也不喪失其分化能力。②P19 細(xì)胞具有多種分化潛力, 不同誘導(dǎo)條件下可定向分化成不同類型的細(xì)胞, 種植到孕鼠囊胚中能分化成多種類型細(xì)胞。③根據(jù)P19 細(xì)胞誘導(dǎo)分化分階段進(jìn)行的特點(diǎn), 能將神經(jīng)分化的早期機(jī)制與參與突起延伸的機(jī)制分開(kāi)研究。④該細(xì)胞易于轉(zhuǎn)染, 且轉(zhuǎn)染后仍能正常分化, 適于進(jìn)行細(xì)胞基因研究。通過(guò)轉(zhuǎn)染正?；蛲蛔兊哪康幕? 增強(qiáng)或抑制它們的表達(dá)水平可用于研究這些基因在神經(jīng)分化中的作用。另外, 利用反義RNA 阻斷內(nèi)源蛋白的表達(dá), 可用來(lái)觀察這些蛋白在神經(jīng)分化中的作用。  
(references:  
1.張金平等. 全反式維甲酸體外誘導(dǎo)P19細(xì)胞向心肌方向分化.[J]中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志.2012.1  
2.梅宇欽等. 建立經(jīng)優(yōu)化的促P19鼠胚胎癌細(xì)胞神經(jīng)分化模型.浙江大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）2012.04)  
細(xì)胞特性  
1）  來(lái)源：胚胎；畸胎癌  
2）  形態(tài)：上皮細(xì)胞樣  
3）  含量：>1x106 個(gè)/mL  
4）  污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  

5）  規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運(yùn)輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺(tái)棄去上清，加入使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存  
小鼠胚胎干細(xì)胞  
細(xì)胞特性  
1）來(lái)源：小鼠，胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)  
2）形態(tài)：球形克隆  
3）含量：>1x106 個(gè)/mL  
4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
細(xì)胞接受后的處理：  
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。  
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。  
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉谩?nbsp; 
細(xì)胞用途：僅供科研使用。  
小鼠胰腺癌beta細(xì)胞  
細(xì)胞介紹  
這株細(xì)胞來(lái)源于轉(zhuǎn)基因小鼠中生長(zhǎng)的一個(gè)胰腺腫瘤(胰島素瘤)。 這種小鼠攜帶了大鼠胰島素II基因啟動(dòng)子調(diào)控的SV40早期基因的假基因結(jié)構(gòu)。 細(xì)胞包含豐富的胰島素和小量的胰高血糖素及。響應(yīng)葡萄糖而分泌胰島素[PubMed:7533732]  
細(xì)胞特性  
1）來(lái)源：胰島素瘤  
2）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)  
3）含量：>1x106 個(gè)/mL  
4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
細(xì)胞接受后的處理：  
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。  
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。  
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉谩?nbsp; 
細(xì)胞用途：僅供科研使用。  
｛其他細(xì)胞系｝  
EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞  
細(xì)胞介紹  
B95-8細(xì)胞株源自暴露于人白血球中抽提的EB病毒的絨猴白血球。B95-8是一個(gè)連續(xù)株并釋放高滴度的轉(zhuǎn)染EB病毒。此細(xì)胞株提供EB病毒用于建立人的連續(xù)淋巴細(xì)胞株。  
細(xì)胞特性  
1）來(lái)源：外周血淋巴細(xì)胞  
2）形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣，懸浮生長(zhǎng)  
3）含量：>1x106 個(gè)/mL  
4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性  
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝  
細(xì)胞接受后的處理：  
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。