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操作步驟：

1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

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從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：PPIL1肽酰脯氨酰異構(gòu)酶酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱：PPIL1 ELISA Kit

規(guī)格：48T/96

貨號(hào)：CS-2465E

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

試劑準(zhǔn)備：

1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

注意事項(xiàng)：

1.試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。

2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。

5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無(wú)微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。

7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。

8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。

對(duì)甲酸乙酯  99%4--3-氟吡 97%Anti-Phospho-Ezrin (Thr567) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化埃茲蛋白抗體IgG

溴乙酸乙酯 98%5-溴-2-氯嘧 97%Anti-Fabp2 /FITC  熒光素標(biāo)記脂肪酸結(jié)合蛋白2抗體IgG

2-庚 98%2-氯-6-氟苯 98%Anti-FABP(brain)/FITC  熒光素標(biāo)記腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體IgG

乙酸正己酯 CP，98%5-(三氟甲基)-2-吡 97%Anti-factor V/FITC  熒光素標(biāo)記5抗體IgG

乙酸異酯 99%2,3,4,5,6-五氟苯基酸 97%Anti-factor VIII/FITC  熒光素標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原抗體IgG

異丁酸異丁酯 98%硫化銨溶液 AR,20% in H2OAnti-factor VIII/FITC  熒光素標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原抗體IgG

,90%氯鉑酸 六水合物 AR,Pt ≥37.5%Anti-factor X III /FITC  熒光素標(biāo)記ⅩⅢ抗體IgG

乙酸異丁酯 99%氯金酸 48～50% Au basisAnti-FADD/FITC  熒光素標(biāo)記Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體IgG

PPIL1肽酰脯氨酰異構(gòu)酶酶聯(lián)免疫試劑盒N，N-二酰 AR，99.5%人巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒8號(hào)染色體開放閱讀框72抗體phospho-HSF1(Ser307)  化熱休克因子1抗體

N，N-二酰 GR，99.9%人巨噬集落激因子受體(M-CSFR)免疫試劑盒7號(hào)染色體開放閱讀框30抗體phospho-HSF1(Ser303)  化熱休克因子1抗體

N，N-二酰  for HPLC, ≥99.9%人巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒7號(hào)染色體開放閱讀框57抗體phospho-HRH1(Ser398)  化組受體H1抗體

N，N-二酰 農(nóng)殘級(jí), ≥99.9%人巨噬激蛋白(MSP)免疫試劑盒7號(hào)染色體開放閱讀框36抗體Phospho-HP1(Tyr43)  異染色質(zhì)蛋白1化抗體（果蠅）

N，N-二酰 ACS光譜級(jí), ≥99.8%人巨泌素免疫試劑盒7號(hào)染色體開放閱讀框42抗體Phospho-HP1 gamma (Ser93)  化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體

N，N-二酰 生物技術(shù)級(jí),≥99.9%人鹽抵抗的性(TRAP)免疫試劑盒7號(hào)染色體開放閱讀框43抗體phospho-HP1 alpha (Tyr24)  化異染色質(zhì)蛋白1抗體（果蠅）

N，N-二酰 for GC-HS, ≥99.9% (GC)人相關(guān)抗原9(SPAG9)抗體免疫試劑盒7號(hào)染色體開放閱讀框44抗體phospho-HOMER3(Thr36)  化HOMER3蛋白抗體

N，N-二酰 分子生物學(xué)級(jí)，≥99.9%人相關(guān)抗原7(SPAG7)免疫試劑盒8號(hào)染色體開放閱讀框40抗體phospho-HNF4 (Ser313)  化肝核因子4α抗體

乙酰乙乙酯  >99.0%(GC)人精脒/精N(1)-乙酰轉(zhuǎn)移樣蛋白1(SATL1)免疫試劑盒8號(hào)染色體開放閱讀框37抗體phospho-HNF4 (Ser304)  化肝核因子4α抗體

正己烷 for HPLC, ≥98.0% (GC) 人精合成(SRM)免疫試劑盒8號(hào)染色體開放閱讀框45抗體phospho-HMGN1(Ser20+Ser24)  化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1

1,6-己二 standard for GC人精氨酰-tRNA合成(RARS)免疫試劑盒8號(hào)染色體開放閱讀框80抗體phospho-HMGCR(Ser872)  化三羥輔A還原抗體

1,6-己二 98%人精氨脫羧(ADC)免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框3抗體Phospho-Histone H3(Thr3)  化組蛋白H3抗體

對(duì)二酚 AR人精氨2(ARG2)免疫試劑盒8號(hào)染色體開放閱讀框47抗體Phospho-Histone H3(Ser28)  化組蛋白H3抗體

正己烷 Standard for GC,>99.5%(GC)人精氨(Arg)免疫試劑盒8號(hào)染色體開放閱讀框48抗體Phospho-Histone H3 (Thr3)  化組蛋白H3抗體

正己烷 AR，97%人緊密連接蛋白1(ZO1)免疫試劑盒8號(hào)染色體開放閱讀框58抗體Phospho-Histone H3 (Thr11)  化組蛋白H3抗體