![]() |
上海莼試生物技術有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價 |

聯(lián)系電話
13585831301
公司信息
- 聯(lián)系人:
- 李小姐
- 電話:
- 021-59541103
- 手機:
- 13585831301
- 售后電話:
- 13585831301
- 傳真:
- 021-60443211
- 地址:
- 上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661號
- 郵編:
參考價 | 面議 |
- 型號 48T 0.1PCR管
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時間:2021-07-16 11:33:30瀏覽次數(shù):230
聯(lián)系我們時請說明是環(huán)保在線上看到的信息,謝謝!
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:BAR基因PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:CP100202
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
產(chǎn)品分類:PCR-熒光探針法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶?
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
地衣芽孢桿菌20號染色體開放閱讀框141抗體Human ANGPTL2(Angiopoietin-related protein 2) ELISA Kit人胱抑素F(CST7)免疫試劑盒
馬闊里類芽孢桿菌20號染色體開放閱讀框160抗體Human OGDH(2-oxoglutaRate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit人胱抑素B(CSTB/CST6/STFB)免疫試劑盒
扣囊復膜孢酵母親環(huán)蛋白(親環(huán)素)40抗體Human CCR4(C-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit人胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)免疫試劑盒
Bacillus aryabhattai T調控相關蛋白抗體Human IKBKB(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit beta) ELISA Kit人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)免疫試劑盒
熱吸水鏈霉菌突觸后蛋白CRIPT抗體Human ROMO1(Reactive oxygen species modulator 1) ELISA Kit人胱天蛋白酶9(Casp-9)免疫試劑盒
米曲霉鈣粘附蛋白8抗體Human THRA(Thyroid hormone receptor alpha) ELISA Kit人胱天蛋白酶8(Casp-8)免疫試劑盒
Bacillus tequilensis6號染色體開放閱讀框174抗體Human FH(FumaRate hydRatase, mitochondrial) ELISA Kit人胱天蛋白酶-5(CASP5)免疫試劑盒
科氏葡萄球菌科氏亞種6號染色體開放閱讀框150抗體Human GAPDH(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) ELISA Kit人胱天蛋白酶3(Casp-3)免疫試劑盒
水生哈薩克斯坦酵母X染色體開放閱讀框56抗體Human MASP1(Mannan-binding lectin serine protease 1) ELISA Kit人胱天蛋白酶12(Casp-12)免疫試劑盒
美味肝菌9號染色體開放閱讀框152抗體Human LSS(Lanosterol synthase) ELISA Kit人胱天蛋白酶10(CASP10)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌6號染色體開放閱讀框58抗體Human IDE(Insulin-degrading enzyme) ELISA Kit人胱天蛋白酶1(Casp-1)免疫試劑盒
爪哇根霉接觸蛋白相關蛋白4抗體Human IFI16(Gamma-interferon-inducible protein 16) ELISA Kit人胱硫β-合酶(CBS)免疫試劑盒
鏈格孢CD24抗體Human KLK7(Kallikrein-7) ELISA Kit人胍基丁脲水解酶/凝集酶(AGMAT)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌接觸蛋白相關蛋白3抗體Human FPR2(N-formyl peptide receptor 2) ELISA Kit人瓜氨酸免疫試劑盒
囊毛霉CD24抗體Human ACAN(Aggrecan core protein) ELISA Kit人骨織素(Ostn)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌限局性核因子3抗體Human 12-HETE(12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit人骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒
BAR基因PCR檢測試劑盒: 羊布氏菌 質量規(guī)格:>98%,BRγ分泌酶elisa試劑盒2-O-alpha-L-鼠李吡喃糖甙鳶尾
產(chǎn)氨短桿菌Brevibacterium│ammoniagenes 質量規(guī)格:BRγ氨基丁酸試劑盒尚含雞納甙
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格:>98%,BRβ-轉導素重復序列包含蛋白試劑盒雙酮草酸鹽
優(yōu)雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質量規(guī)格:BRβ抑制蛋白2試劑盒水甘草堿
擬諾卡氏菌屬菌種Nocardiopsis│sp. 質量規(guī)格:商品級β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白試劑盒沙蟾精
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規(guī)格:>97%,BRβ素試劑盒三十烷
同溫層芽孢桿菌Bacillus│stratosphericus 質量規(guī)格:>99%,BRβ位淀粉樣前體蛋白裂解酶2試劑盒蘇Ⅳ
淺白隱球酵母Cryptococcus│albidus 質量規(guī)格:>99%,BRβ位淀粉樣前體蛋白裂解酶1試劑盒紅Ⅲ