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上海莼試生物技術(shù)有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià)

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公司信息

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48T 0.1PCR管tE9基因PCR檢測(cè)試劑盒
tE9基因PCR檢測(cè)試劑盒
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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào) 48T 0.1PCR管
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

更新時(shí)間:2021-07-16 11:41:16瀏覽次數(shù):383

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【簡(jiǎn)單介紹】
tE9基因PCR檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品:
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品紫檀芪
小單孢菌屬M(fèi)icromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品97.5%苷G
康寧木霉Trichoderma│koningii 質(zhì)量規(guī)格:0.98苷I

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:tE9基因PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):CP100216
產(chǎn)品規(guī)格:48T  0.1PCR管/48T   0.2PCR管
產(chǎn)品分類:PCR-熒光探針?lè)?/span>
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
?
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
毛簇木霉2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框18抗體Human SLC50A1(Sugar transporter SWEET1) ELISA Kit人電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白-泛醌氧化還原酶/電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)免疫試劑盒

植物乳桿菌植物亞種色素c氧化酶6抗體Human SNAP25(Synaptosomal-associated protein 25) ELISA Kit人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)免疫試劑盒

首爾鏈霉菌嗜酸粒趨化蛋白24抗體Human DDR2(Discoidin domain-containing receptor 2) ELISA Kit人電壓門(mén)控通道抗體(VGKC-ab)免疫試劑盒

束紅球菌巨噬炎性蛋白15Human NFE2L1(Nuclear factor erythroid 2-related factor 1) ELISA Kit人電壓門(mén)控通道(VGKC)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌巨噬炎性蛋白抗體Human PTGES(Prostaglandin E synthase) ELISA Kit人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)免疫試劑盒

黃色籃狀菌CD72蛋白抗體Human CHAD(Chondroadherin) ELISA Kit人第10號(hào)染色體缺失并與張力蛋白同源的磷酸酶(PTEN/MMAC1)免疫試劑盒

粗毛假蜜環(huán)菌中心體蛋白128抗體Human SNAP25(Synaptosomal-associated protein 25) ELISA Kit人抵抗素樣分子β(RELM-β)免疫試劑盒

釀酒酵母著絲粒蛋白O抗體Human SLC50A1(Sugar transporter SWEET1) ELISA Kit人抵抗素(Resistin)免疫試劑盒

阿達(dá)青霉3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框17抗體Human TTPAL(Alpha-tocopherol transfer protein-like) ELISA Kit人低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)免疫試劑盒

煙曲霉質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體Human HSPE1(10 kDa heat shock protein, mitochondrial) ELISA Kit人低氧誘導(dǎo)因子2(HIF-2)免疫試劑盒

成晶節(jié)桿菌磷酸化質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體Human LIG3(DNA ligase 3) ELISA Kit人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)免疫試劑盒

隆德假單胞菌3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體Human C1S(Complement C1s subcomponent) ELISA Kit人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP-5)免疫試劑盒

噬果膠黃桿菌補(bǔ)體C3b抗體Human PGLYRP2(N-acetylmuramoyl-L-alanine amidase) ELISA Kit人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)抗體(IgG)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌補(bǔ)體C3b-α鏈抗體Human COLEC11(Collectin-11) ELISA Kit人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)免疫試劑盒

鴨疫里默氏桿菌CD3抗體Human CD109(CD109 antigen) ELISA Kit人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)免疫試劑盒

天麻萌發(fā)菌8103號(hào)*著絲粒蛋白C1抗體Human CNTN1(Contactin-1) ELISA Kit人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)免疫試劑盒
tE9基因PCR檢測(cè)試劑盒: 蘇云金芽胞桿菌東北亞種 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRRho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶2試劑盒硫秋水仙苷

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>96.5%,BRRho GDP解離抑制因子1試劑盒輪環(huán)藤寧

Clostridium  cellulosiClostridium  cellulosi 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRREST協(xié)阻抑因子3試劑盒龍膽山酮酚

堅(jiān)強(qiáng)芽胞桿菌Bacillus│firmus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRras同源物基因家族成員b試劑盒氯內(nèi)酯

百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRQ熱科克斯體2試劑盒藜蘆酸

鏈球菌屬Streptococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BPQ熱科克斯體2試劑盒龍血素C

曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRQ熱科克斯體1試劑盒龍血素A
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。



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