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公司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)的培養(yǎng)基，李氏菌增菌肉湯（LB1）說(shuō)明書(shū)
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產(chǎn)品名稱(chēng)：李氏菌增菌肉湯（LB1）說(shuō)明書(shū)
英文名稱(chēng)：Listeria Enrichment Broth Base
產(chǎn)品規(guī)格：9ml*20支/包
產(chǎn)品用途：用于李氏菌二步增菌用于李氏菌二步增菌
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1.稱(chēng)量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物
3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
按其物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三類(lèi)：
（1）固體培養(yǎng)基。是在培養(yǎng)基中加入凝固劑，有瓊脂、明膠、硅膠等。固體培養(yǎng)基常用于微生物分離、鑒定、計(jì)數(shù)和菌種保存等方面。
（2）液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基中不加任何凝固劑。這種培養(yǎng)基的成分均勻，微生物能充分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料，適于作生理等研究，由于發(fā)酵率高，操作方便，也常用于發(fā)酵工業(yè)。
（3）半固體培養(yǎng)基。是在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態(tài)?？捎糜谟^察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種和測(cè)定噬菌體的效價(jià)等方面。培養(yǎng)基按微生物的種類(lèi)可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)基等四類(lèi)。
的步驟：
（一）準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
（二）校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。
（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。
（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。
活性氧（ROS）生成狀態(tài)。 測(cè)定原理： 復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+，在340nm下測(cè)定NADH的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾。 
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測(cè)試盒 規(guī)格：25管/24樣  測(cè)試方法：紫外分光光度法 測(cè)定意義 復(fù)合體Ⅰ（EC 1.6.5. 3）又稱(chēng)NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是線粒體內(nèi)膜中zui大的蛋白復(fù)合物。該酶催化一對(duì)電子從NADH傳遞給CoQ，同時(shí)可使O2還原生成O2.-，是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2.-的主要部位。測(cè)定該酶活性，不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈（ETC）狀態(tài)，而且可以反映活性氧（ROS）生成狀態(tài)。 測(cè)定原理 復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+，在340nm下測(cè)定NADH的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小。 需自備的儀器和用品 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾。 
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ/琥珀酸-輔酶Q還原酶測(cè)試盒 規(guī)格： 100管/96樣  測(cè)試方法：微量法 測(cè)定意義： 線粒體復(fù)合體Ⅱ又稱(chēng)琥珀酸-輔酶Q還原酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，催化琥珀酸氧化生成延胡索酸，同時(shí)輔基FAD還原為FADH2，后者進(jìn)一步還原氧化型輔酶Q生成還原型輔酶Q，是呼吸電子傳遞鏈的支路。 測(cè)定原理： 復(fù)合體Ⅱ的催化產(chǎn)物還原型輔酶Q可進(jìn)一步還原2,6-二氯吲哚酚，2,6-二氯吲哚酚在605nm有特征吸收峰，通過(guò)檢測(cè)2,6-二氯吲哚酚的減少速率來(lái)計(jì)算該酶活性。 需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾。 
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ/琥珀酸-輔酶Q還原酶測(cè)試盒 規(guī)格：25管/24樣  測(cè)試方法：可見(jiàn)分光光度法 測(cè)定意義 線粒體復(fù)合體Ⅱ又稱(chēng)琥珀酸-輔酶Q還原酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，催化琥珀酸氧化生成延胡索酸，同時(shí)輔基FAD還原為FADH2，后者進(jìn)一步還原氧化型輔酶Q生成還原型輔酶Q，是呼吸電子傳遞鏈的支路。 測(cè)定原理 復(fù)合體Ⅱ的催化產(chǎn)物還原型輔酶Q可進(jìn)一步還原2,6-二氯吲哚酚，2,6-二氯吲哚酚在605nm有特征吸收峰，通過(guò)檢測(cè)2,6-二氯吲哚酚的減少速率來(lái)計(jì)算該酶活性。 需自備的儀器和用品 可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾。 
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ/CoQ-還原酶測(cè)試盒 規(guī)格：100管/96樣  測(cè)試方法：微量法 測(cè)定意義： 線粒體復(fù)合體Ⅲ（EC 1.10.2.2）又稱(chēng)CoQ-還原酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分，負(fù)責(zé)把還原型CoQ的氫傳遞給，生成還原型。 測(cè)定原理： 與氧化型不同，還原型在550nm有特征光吸收，因此550nm光吸收增加速率能夠反映線粒體復(fù)合體Ⅲ酶活性。 需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾。 
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ/CoQ-還原酶測(cè)試盒 規(guī)格：25管/24樣  測(cè)試方法：可見(jiàn)分光光度法 測(cè)定意義 線粒體復(fù)合體Ⅲ（EC 1.10.2.2）又稱(chēng)CoQ-還原酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分，負(fù)責(zé)把還原型CoQ的氫傳遞給，生成還原型。 測(cè)定原理 與氧化型不同，還原型在550nm有特征光吸收，因此550nm光吸收增加速率能夠反映線粒體復(fù)合體Ⅲ酶活性。 需自備的儀器和用品 可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾。 
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ/氧化酶測(cè)試盒 規(guī)格： 100管/96樣  測(cè)試方法：微量法 測(cè)定意義： 線粒體復(fù)合體Ⅳ又稱(chēng)氧化酶，也是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分，負(fù)責(zé)催化還原型的氧化，并zui終把電子傳遞給氧，生成。 測(cè)定原理： 還原型在550nm有特征光吸收，線粒體復(fù)合體Ⅳ催化還原型生成氧化型，因此550nm光吸收下降速率能夠反映線粒體復(fù)合體Ⅳ酶活性。 需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾。 
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ/氧化酶測(cè)試盒 規(guī)格：25管/24樣  測(cè)試方法：可見(jiàn)分光光度法 測(cè)定意義 線粒體復(fù)合體Ⅳ又稱(chēng)氧化酶，也是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分，負(fù)責(zé)催化還原型的氧化，并zui終把電子傳遞給氧，生成。 測(cè)定原理 還原型在550nm有特征光吸收，線粒體復(fù)合體Ⅳ催化還原型生成氧化型