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原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩Ｏ瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。

大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

大鼠睪丸間質(zhì)分離自睪丸組織；睪丸間質(zhì)細(xì)胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈圓形，橢圓形或不規(guī)則形，胞體較大，直徑約20μm，胞質(zhì)呈嗜酸性，細(xì)胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央，染色較淡，有1～2個(gè)核仁線粒體多，呈管嵴狀，無分泌顆粒。從青春期開始，睪丸間質(zhì)細(xì)胞受垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的間質(zhì)細(xì)胞刺激素（黃體生成素）的作用，能合成分泌雄性激素，可促進(jìn)的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育，以及維持第二性征和性功能。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠睪丸間質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠睪丸間質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai spindle aibody (MSA) ELISA Kit 人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA試劑盒

Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAGEsELISAKit大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格：48T/96T

血液腎素(renin)熒光定量檢測試劑盒20次

MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物Eelisa試劑盒   植物E試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   植物E試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：植物E試劑盒、植物E elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人chemerinelisa試劑盒   人chemerin試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人chemerin試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人chemerin試劑盒、人chemerin elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人12羥二十烷四烯酸elisa試劑盒   人12羥二十烷四烯酸試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人12羥二十烷四烯酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人12羥二十烷四烯酸試劑盒、人12羥二十烷四烯酸elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISA 試劑盒

Rat ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒

HumanCailageglycoprotein39,HCgp-39ELISAKit 人軟骨糖蛋白39(HCgp-39)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1AbELISA試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物谷氨酰半胱合成酶(glamylsysteinesyhetase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humanβ-glucuronidase，βGDELISAKit人β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

PAX8(Paired box gene 8 0.5mgPAX8(Paired box gene 8) 配對盒基因8抗原

TRIB3重組人 TRIB3 / TRB3 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

AFM Protein Human 重組人 AFM / Afamin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

BMPR1A Protein Human 重組人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞PAX8(Paired box gene 8 0.5mgPAX8(Paired box gene 8) 配對盒基因8抗原

AFM Protein Human 重組人 AFM / Afamin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BMPR1A Protein Human 重組人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

TRIB3重組人 TRIB3 / TRB3 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein