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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮分離自骨組織；股骨頭（caput femoris）呈圓形，約占一圓球的2/3，其上為關(guān)節(jié)軟骨所覆蓋，在其頂部微后有一小窩，稱為股骨頭凹，為股骨頭韌帶附著處，股骨頭可由此獲得少量血供。股骨頭骨髓的微血管結(jié)構(gòu)為珊瑚狀，后毛細(xì)血管微動脈與微靜脈部分膨大、迂曲、互相纏繞；骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成了骨內(nèi)微血管的內(nèi)襯，與骨內(nèi)其他成分聯(lián)系密切，參與了許多骨的病理生理過程在骨吸收新骨的形成血管再生營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)骨內(nèi)代謝產(chǎn)物輸出及維持骨內(nèi)微環(huán)境平衡方面具有重要作用。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，細(xì)胞純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮采用混合膠原酶消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)

消化液：0.25%，Accutase

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat osteoclast differeiation factor (ODF) ELISA Kit 大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒

Humanai-phospholipidaibody,Apl/APAELISAKit 人抗0脂抗體(Apl/APA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanbetacellulin,BTCELISA試劑盒人β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物種子甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒3次

Humaargetedribonuclease,ELISAKit人靶向核糖核酸酶()ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠神經(jīng)型合酶(NOS1)ELISA試劑盒 ，英文名： NOS1 ELISA Kit

Mouse cyclin D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒

RatVitaminC,VCELISAKit 大鼠C(VC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHB-EGF(Humanheparin-bindingepidermalgrowthfactor-likegrowthfactor)ELISAKit人肝素結(jié)合性表皮生長因子規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞半胱(cysteine)含量比色法定量檢測試劑盒20次

Ricinuscommunisagglinin,RCAELISAKit蓖麻凝集素(RCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein

信號素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)

VMO1重組人 VMO1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞信號素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)

FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

VMO1重組人 VMO1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。