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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

大鼠海綿體平滑肌分離自海綿體組織；海綿體，又稱海綿體肌，是最硬的平滑肌和結(jié)締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅(jiān)厚的白膜，內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中，在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系，破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細(xì)胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠海綿體平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠海綿體平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai IVIgG aibody ELISA Kit 人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒

Porcineiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit 豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforALB(Humanmicroalbunminuria)ELISAKit人尿微量白蛋白規(guī)格：48T/96T

血液(UROKINASE)活性熒光定量檢測試劑盒20次

MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

中文名稱   方法   規(guī)格

人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒

Rat angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒

HumanAi-mitochondriaaoaibodies,AMAELISAKit 人抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancytotoxin,CTXELISA試劑盒人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織IKKα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Humanplasminogenactivator，PLGAELISAKit人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

SERPINF2重組小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)

HOXA1重組人 HOXA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AKR1B1 Protein Human 重組人 AKR1B1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SFRP4 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)

AKR1B1 Protein Human 重組人 AKR1B1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SERPINF2重組小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SFRP4 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HOXA1重組人 HOXA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。