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上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價 |

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公司信息
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- 上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661號
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參考價 | ¥1-¥5800 | /件 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
更新時間:2024-09-29 16:55:23瀏覽次數(shù):63
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商品屬性:
組織來源 | 肌肉組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | CS-X3188 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介:
大鼠肌源性干分離自肌肉組織;肌源性干細胞(MDSCs)屬于成體多能干細胞,具有多細胞系分化和自我更新能力。通過誘導刺激,MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細胞等多種細胞和組織類型;作為基因治療和組織工程的供體細胞,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點;近年來,肌源性干細胞在治療尿失禁等方面的應用逐步得到重視。需注意的是,肌源性干細胞主要存在于骨骼肌組織中,只是成熟組織的很少部分細胞;平時處于靜止狀態(tài),在細胞應激和組織缺失時才會激活;并且隨著年齡的增加,所含細胞數(shù)量逐漸減少,而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進行。肌源性干細胞的體外擴增對細胞移植和干細胞介導的基因治療至關(guān)重要。對肌源性干細胞的擴增研究發(fā)現(xiàn),EGF、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細胞進入有絲分裂周期,從而刺激細胞增生。更重要的是,細胞因子誘導的體外擴增可以通過自我更新不刺激細胞分化,從而保持干細胞表型。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠肌源性干經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠肌源性干采用膠原酶-蛋白酶-聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法,最后通過肌源性干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞VS細胞系:
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。
原代細胞一般傳至10代左右,大部分細胞衰老死亡,但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去,存活的細胞一般能夠傳到40-50代,叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機",這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c,從而可能無限制地傳代下去,稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系,因此,細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞,廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點,也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
原代細胞培養(yǎng)的具體步驟:
1、準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng):置于37℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。
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