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本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡介：

大鼠胚胎成纖維分離自胚胎；成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞常用作ES細(xì)胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細(xì)胞，能產(chǎn)生抑制ES細(xì)胞自主分化和促進(jìn)ES細(xì)胞增殖的因子，故能有效地促進(jìn)ES細(xì)胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性，且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子，而且可以為ES細(xì)胞的培養(yǎng)提供類似于體內(nèi)的微環(huán)境，故在研究哺乳動(dòng)物ES細(xì)胞中得到廣泛使用。

原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚胎成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚胎成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human calcitonin gene related peptide (CGRP) ELISA Kit 人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒

PorcineEsadiol,E2ELISAKIT 豬雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAMAIgA(Humanai-myelinaibodyIgA)ELISAKit人抗髓0脂抗體IgA規(guī)格：48T/96T

血液還原型(GSH)濃度比色法定量檢測試劑盒50次

PlaVitaminD3,VD3ELISAKit植物D3(VD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬核轉(zhuǎn)錄因子kb-p65(NF-kBp65)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬核因子κB抑制蛋白α（IKB-α）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠FK506結(jié)合蛋白12-雷帕相關(guān)蛋白1(FRAP1)ELISA試劑盒 ，英文名： FRAP1 ELISA Kit

Rabbit thrombomodulin (TM) ELISA Kit 兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠型纖溶酶原激活物受體(mouse uPA-R) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforICA(Humanisletcellaibody)ELISAKit人胰島細(xì)胞抗體規(guī)格：48T/96T

通用型伊紅染色試劑盒100次

ELISAKitAQP-5大鼠水通道蛋白5規(guī)格：48T/96T

IFNA8重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

Leptin 瘦素(多肽抗原 0.5mgLeptin 瘦素(多肽抗原)

ROBO4重組人 ROBO4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

APOA1 Protein Human 重組人 APOA1 / ApoAI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LTF Protein Mouse 重組小鼠 Lactotransferrin / LTF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠胚胎成纖維細(xì)胞Leptin 瘦素(多肽抗原 0.5mgLeptin 瘦素(多肽抗原)

APOA1 Protein Human 重組人 APOA1 / ApoAI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

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LTF Protein Mouse 重組小鼠 Lactotransferrin / LTF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

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