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原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

大鼠三叉神經(jīng)元細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠三叉神經(jīng)元分離自三叉神經(jīng)組織；三叉神經(jīng)為最粗大的混合性腦神經(jīng)，含一般軀體感覺和特殊內(nèi)臟運動兩種纖維。其特殊內(nèi)臟運動纖維起于腦橋中段的三叉神經(jīng)運動核，纖維組成三叉神經(jīng)運動根，由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦，位于感覺根下內(nèi)側(cè)，最后進入三叉神經(jīng)第3支下頜神經(jīng)中，經(jīng)卵圓孔出顱，隨下頜神經(jīng)分支分布于咀嚼肌等。運動根內(nèi)還含有三叉神經(jīng)中腦核有關的纖維，主要傳導咀嚼肌的本體感覺。三叉神經(jīng)內(nèi)以軀體感覺神經(jīng)纖維為主，這些纖維的細胞體位于三叉神經(jīng)節(jié)（半月節(jié)）內(nèi)，該神經(jīng)節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經(jīng)壓跡處，為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經(jīng)節(jié)由假單極神經(jīng)元組成，其中樞突集中構成了粗大的三叉神經(jīng)感覺根，由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦，止于三叉神經(jīng)諸感覺核，其中傳導痛溫覺的纖維主要終止于三叉神經(jīng)脊束核；傳導觸覺的纖維主要終止于三叉神經(jīng)腦橋核。三叉神經(jīng)節(jié)細胞的周圍突組成三叉神經(jīng)三大分支，即第1支眼神經(jīng)、第2支上頜神經(jīng)、第3支為下頜神經(jīng)。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內(nèi)、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等，傳導痛、溫、觸等多種感覺。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠三叉神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠三叉神經(jīng)元采用消化法結合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

豬葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GL2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human formylmethionine (fMet) ELISA Kit 人甲酰甲硫(fMet)ELISA試劑盒

guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforANGELISAKit大鼠血管生長素規(guī)格：48T/96T

血液元素比色法定量檢測試劑盒20次

PorcineCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit豬Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 ，英文名： IP-10/CXCL10 ELISA Kit

Rabbit prolactin (PRL) ELISA Kit 兔子催乳素(PRL)ELISA試劑盒

溶藻弧菌(VA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMDC/CCL22(MouseMacrophage-DerivedChemokine)ELISAKit小鼠巨噬細胞來源的趨化因子規(guī)格：48T/96T

體液前列腺型酸型性0酸酶(PACP)活性比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitsIgA牛分泌型免疫球蛋白A規(guī)格：48T/96T

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 標簽) Protein

Ⅻ(F12)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor XII (F12)

BVES重組人 BVES / POPDC1 蛋白 (GST 標簽) Protein

ATL1 Protein Human 重組人 ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 蛋白 (GST 標簽)

M1 Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 標簽)

大鼠三叉神經(jīng)元細胞Ⅻ(F12)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor XII (F12)

ATL1 Protein Human 重組人 ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 蛋白 (GST 標簽)

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 標簽) Protein

M1 Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 標簽)

BVES重組人 BVES / POPDC1 蛋白 (GST 標簽) Protein