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大鼠食管上皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠食管上皮分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變?yōu)閺?fù)層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在食管與胃賁門交界處，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復(fù)層扁平上皮細胞覆蓋，其頂端細胞膜和細胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障，防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細胞的基質(zhì)外側(cè)細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學(xué)上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠食管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠食管上皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴(yán)格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

豬髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3 (TIMP-3) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒

GuineaPigplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforANGPTL3(Humanangiopoietin-likeprotein3)ELISAKit人血管生成素樣蛋白3規(guī)格：48T/96T

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豬托克特諾病毒(TTV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬托克特諾病毒(TTV)核酸檢測試劑盒(-PCR法)   48T

豬腦心肌炎病毒(EMCV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬腦心肌炎病毒(EMCV)核酸檢測試劑盒(-PCR法)   48T

大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 ，英文名： TIEG1 ELISA Kit

Rabbit nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠可溶性L-選擇素(mouse sL-Selectin/sCD62L) 48T/96T 進口分裝

48TIFVIgM/IFV-AIgM流感病毒AIgM(間接法二步法)ELISA試劑盒48T48T

通用型禽白血病J亞型(avianleukosisvirussubgroupJ;ALV-J)試劑盒20次

大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit，48T/96T大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit，48T/96T規(guī)格：48T/96T

HA重組甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

rDen-2(rh-Dengue Virus 100ugrDen-2(rh-Dengue Virus) 重組人登革熱病毒2型診斷抗原

IL3RA重組人 IL3RA / CD123 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

BCCIP Protein Human 重組人 BRCA2 / BCCIP 蛋白

FKBP1A Protein Human 重組人 FKBP12 蛋白 (His 標(biāo)簽)

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