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上海莼試生物技術(shù)有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià)

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大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)
大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)
參考價(jià)1-5800/件
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【簡(jiǎn)單介紹】
組織來源 外周血 產(chǎn)品規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
生長(zhǎng)特性 半貼壁半懸浮 細(xì)胞形態(tài) 圓形,樹突狀
換液頻率 每2-3天換液一次 用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)公司正要出售的產(chǎn)品:BRL細(xì)胞,肝細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,9L-E細(xì)胞 人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 羊膜細(xì)胞,H.A.細(xì)胞

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟:

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)
1、準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。

3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

4、剪切:用眼科剪把組織切成2-3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30-50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。

5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩O瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng):置于37℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時(shí)需要換新塞。

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

商品屬性:
大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

組織來源

外周血

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號(hào)

CS-X3571

生長(zhǎng)特性

半貼壁半懸浮

 

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

大鼠外周血DC分離自外周血,由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞,典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長(zhǎng),在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強(qiáng)的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長(zhǎng), 細(xì)胞呈圓形,細(xì)胞體積進(jìn)一步增大,表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80CD86等共刺激分子,進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細(xì)胞的第二信號(hào),可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,一般在30%以下。

方法簡(jiǎn)介:

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血樹突狀(成熟DC)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì) 胞 形態(tài)等綜合鑒定,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè):

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息:

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài):圓形,樹突狀

傳代特性:屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

原代細(xì)胞VS細(xì)胞系:

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)
用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說,從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞,絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

原代細(xì)胞一般傳至10代左右,大部分細(xì)胞衰老死亡,但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去,存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代,叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)",這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),從而可能無限制地傳代下去,稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系,因此,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞,廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn),也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

公司正在銷售的產(chǎn)品:
大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

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FCGR1重組人 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

G6B Protein Human 重組人 G6B / C6ORF25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

THPO Protein Human 重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)

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G6B Protein Human 重組人 G6B / C6ORF25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CRP重組人 CRP / C-Reactive 蛋白 Protein

THPO Protein Human 重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FCGR1重組人 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein




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