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原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。

大鼠胰島β細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠胰島β分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖；γ細(xì)胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細(xì)胞，即胰島B細(xì)胞，是胰島細(xì)胞的一種，屬內(nèi)分泌細(xì)胞的一種，能分泌胰島素，與胰島α細(xì)胞分泌的胰高血糖素一起起到調(diào)節(jié)血糖的作用。胰島B細(xì)胞功能受損、胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足（胰島素抵抗），會(huì)使血糖升高，從而引發(fā)糖尿病。而胰島B細(xì)胞癌變會(huì)生成胰島素瘤，引起惡性血糖降低癥狀。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰島β經(jīng)Insulin含量檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰島β采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用逐級(jí)消化胰島制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ribonuclease (RNASE) ELISA Kit 人核糖核酸酶(RNASE)ELISA試劑盒

RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 兔抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforApo-E(RabbitApolipoproteinE)ELISAKit兔載脂蛋白E規(guī)格：48T/96T

血紅細(xì)胞直接溶解液500毫升

Porcinemacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

總鐵結(jié)合力（TIBC）測(cè)定試劑盒（比色法）

髓過(guò)氧化物酶（MPO）測(cè)定試劑盒

乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒（比色法）

乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒（微板法）

大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1sRⅡ ELISA Kit

Rabbit hepatocyte growth factor (HGF) ELISA Kit 兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠白介素-8(mouse IL-8) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-4(MouseIerleukin4)ELISAKit小鼠白介素4規(guī)格：48T/96T

通用型雞傳染性喉氣管炎(ILT)試劑盒20次

ELISAKitIGFBP-1大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1規(guī)格：48T/96T

BST1重組大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

galectin 9 半乳糖凝集素9(抗原 0.5mggalectin 9 半乳糖凝集素9(抗原)

CPLX2重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

C1D Protein Human 重組人 C1D 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

IL6ST Protein Mouse 重組小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠胰島β細(xì)胞galectin 9 半乳糖凝集素9(抗原 0.5mggalectin 9 半乳糖凝集素9(抗原)

C1D Protein Human 重組人 C1D 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

BST1重組大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL6ST Protein Mouse 重組小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CPLX2重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein