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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡介：

大鼠胰腺導(dǎo)管上皮分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖；γ細(xì)胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。成體胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞作為胰腺前體細(xì)胞，已證實(shí)具多向分化潛能，在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細(xì)胞，胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞免疫原性如何，轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞在治療糖尿病時(shí)是否發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，對干細(xì)胞臨床治療糖尿病具有重要意義。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺導(dǎo)管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺導(dǎo)管上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬總蛋白(TPS)ELISA試劑盒 96T/48T

Human nuclear maix protein 22 (NMP-22) ELISA Kit 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA試劑盒

Rabbitplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforApo-E(HumanApolipoproteinE)ELISAKit人載脂蛋白E規(guī)格：48T/96T

血白細(xì)胞分離試劑盒10/50/100次

Porcinemelanomametastasissurfaceadhesionmolecule,MMSAMELISAKit豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

總鐵快速測試盒   Total iron rapid test case

錳快速測試盒   Manganese rapid test case

鎳快速測試盒   Nickel rapid test case

PH值快速測試盒   PH quick test case

大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 ，英文名： NF-κB p65 ELISA Kit

Rabbit heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒

嗜肺軍團(tuán)桿菌(LP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseBeta-catenin,Beta-catELISAKit小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白規(guī)格：48T/96T

體液肌酸激酶(CK)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次

2D3/DVD/DHVD3OH人1,25二羥基D3規(guī)格：48T/96T

BCAM重組小鼠 BCAM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

癌胚抗原(CEA)重組蛋白 Recombinant Carcinoembryonic Antigen (CEA)

GSTZ1重組人 GSTZ1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FGFR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞谷半胱連接酶(GCLM)重組蛋白 Recombinant Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit (GCLM)

C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HAVCR2重組小鼠 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白

SPHK1重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白 Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。