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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

人肝內(nèi)膽管上皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

人肝內(nèi)膽管上皮分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調(diào)控的分泌和吸收，在保持、調(diào)整和擴大膽小管的結構中發(fā)揮重要作用，肝內(nèi)膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%，其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復雜的網(wǎng)狀管形結構。肝內(nèi)膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能，參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程，在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用。研究表明，常見的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病，都是以肝內(nèi)膽管上皮細胞為病變靶位，進而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此，了解正常肝內(nèi)膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的人肝內(nèi)膽管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人肝內(nèi)膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，接種至預先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中，通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 人抗粒細胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒

Humanmelatoninsulfate,MSELISAKit 人硫酸褪黑色素(MS)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforABeta1-40(Mouseamyloidbetapeptide1-40)ELISAKit小鼠β淀粉樣蛋白規(guī)格：48T/96T

乙肝病毒DNA化試劑盒20次

MouseMyoglobin,MYO/MBELISAKit小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

血漿游離基因組DNA提取試劑盒   Plasma free genomic DNA Exaction Kit

M13單鏈基因組DNA快速提取試劑盒   Rapid exaction kit for M13 phage single chain genomic DNA

λ基因組DNA快速提取試劑盒   Fast exaction kit for phage genomic DNA

超土壤基因組DNA快速提取試劑盒   Rapid exaction kit for genomic DNA in soil

大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒 ，英文名： PKB ELISA Kit

Porcine serum niic oxide (NO) ELISA Kit 豬血清(NO)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠血管緊張素轉化酶(mouse ACE) 48T/96T 分裝

CLIAKitforLp-PL-A2ELISAKit大鼠脂蛋脂酶A2規(guī)格：48T/96T

通用細胞HRP酶聯(lián)檢測封閉溶液100毫升

ELISAKitFSH雞促卵泡素規(guī)格：48T/96T

LILRB3重組小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 (His 標簽) Protein

白介素7(IL7)重組蛋白 Recombinant Interleukin 7 (IL7)

GUCA1A重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標簽)

IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (Fc 標簽)

人肝內(nèi)膽管上皮細胞ANPEN/CD13(Aminopeptidase N 0.5mgANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標簽)

F11R重組小鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein

CD68 Protein Rat 重組大鼠 CD68 / Macrosialin 蛋白 (His 標簽)

PA2G4重組人 EBP1 / PA2G4 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。