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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱(chēng)為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以?xún)?nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞。

人脈絡(luò)膜黑色素細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人脈絡(luò)膜黑色素分離自眼球脈絡(luò)膜組織；脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細(xì)胞，對(duì)外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差，當(dāng)眼球受到從前面來(lái)的外力的沖擊作用通過(guò)玻璃體傳到后極部時(shí)，堅(jiān)硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡(luò)膜呈暗褐色，圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細(xì)血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營(yíng)養(yǎng)視網(wǎng)膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營(yíng)養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時(shí)對(duì)視覺(jué)系統(tǒng)起保護(hù)作用，對(duì)整個(gè)視覺(jué)神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細(xì)胞，有營(yíng)養(yǎng)和遮光作用。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人脈絡(luò)膜黑色素經(jīng)Dopa染色檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人脈絡(luò)膜黑色素先用消化、后-膠原酶混合消化結(jié)合專(zhuān)用培養(yǎng)基篩選法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次；

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 長(zhǎng)梭形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱(chēng)為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類(lèi)多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：

小鼠合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat protein phosphatase (PP) ELISA Kit 大鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒

Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit 人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor17-KS(Human17-ketosteroids)ELISAKit人17-同類(lèi)固醇規(guī)格：48T/96T

飲料精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠組胺elisa試劑盒   小鼠組胺試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠組胺試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠組胺試劑盒、小鼠組胺elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠壞死因子可溶性受體elisa試劑盒   小鼠壞死因子可溶性受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠壞死因子可溶性受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠壞死因子可溶性受體試劑盒、小鼠壞死因子可溶性受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠癌標(biāo)志物elisa試劑盒   小鼠癌標(biāo)志物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠癌標(biāo)志物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠癌標(biāo)志物試劑盒、小鼠癌標(biāo)志物elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠絨毛膜elisa試劑盒   小鼠絨毛膜試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠絨毛膜試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠絨毛膜試劑盒、小鼠絨毛膜elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

大鼠24S-羥化酶(CYP46)ELISA試劑盒 ，英文名： CYP46 ELISA Kit

Porcine insulin (INS) ELISA Kit 豬胰島素(INS)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠脂聯(lián)素(mouse Adiponectin) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforLp-Alpha(MouselipoproteinAlpha)ELISAKit小鼠脂蛋白α規(guī)格：48T/96T

通用型CHIPDNA分子克隆試劑盒10次

ELISAKitPD雞白痢抗體檢測(cè)規(guī)格：48T/96T

NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

外生骨疣樣蛋白1(EXTL1)重組蛋白 Recombinant Exostoses Like Protein 1 (EXTL1)

GHRH重組人 GHRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD200R1 Protein Human 重組人 CD200R1 / CD200R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人脈絡(luò)膜黑色素細(xì)胞外生骨疣樣蛋白1(EXTL1)重組蛋白 Recombinant Exostoses Like Protein 1 (EXTL1)

CD200R1 Protein Human 重組人 CD200R1 / CD200R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GHRH重組人 GHRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線(xiàn)消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。