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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡介：

人腦微血管內(nèi)皮分離自腦組織；腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分，它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進(jìn)入大腦，大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在腦血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同，大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子，調(diào)控白細(xì)胞進(jìn)入大腦。由于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的器官特異性，內(nèi)皮細(xì)胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。其主要特征如下：①腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存在許多細(xì)胞間緊密連接，產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗，延遲細(xì)胞旁的通量；②腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu)，其液相物質(zhì)胞飲水平較低；③腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對(duì)稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腦微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腦微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble tumor necrosis factor (sTNF a R) ELISA Kit 人可溶性壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒

Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit 人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor1,3-BetaD-GluELISAKit大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶規(guī)格：48T/96T

飲料糖精(saccharin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20次

Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠脂肪酸合成酶   英文名稱：   Mouse Fatty Acid Syhase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FAS

小鼠促卵泡生成激素   英文名稱：   Mouse Follicle Stimulating Hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FSH

小鼠卵泡休止素   英文名稱：   Mouse Follistatin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FST

小鼠叉頭框蛋白O3   英文名稱：   Mouse Forkhead Box protein O3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FOXO3

大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒 ，英文名： D2R ELISA Kit

Porcine heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒

蟹特定基因序列(Cytb)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLTE4ELISAKit大鼠白三烯E4規(guī)格：48T/96T

體液總抗氧化能力(TAC)化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitCA雞酶規(guī)格：48T/96T

REG1B重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IRAK 2 白介素-1受體相關(guān)激酶2 0.5mgIRAK 2 白介素-1受體相關(guān)激酶2

EPOR & CD131重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白 Protein

CD27 Protein Human 重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RETN Protein Mouse 重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞IRAK 2 白介素-1受體相關(guān)激酶2 0.5mgIRAK 2 白介素-1受體相關(guān)激酶2

CD27 Protein Human 重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

REG1B重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

RETN Protein Mouse 重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EPOR & CD131重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白 Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。