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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡介：

人乳腺上皮分離自乳腺組織；乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺，主要由腺上皮細(xì)胞組成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡；近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞（MEC）有密切聯(lián)系，體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織，乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長因子共同調(diào)控，其中乳腺表達(dá)的生長因子對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的增殖、分化、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮分離自分娩后3-5天的乳腺組織，為貼壁生長型細(xì)胞，呈多角形、圓形以及短梭形；乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human mucin (ORM) ELISA Kit 人類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒

Humaibonuclease,RNASEELISAKit 人核糖核酸酶(RNASE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Bacillusthuringiensis,BTELISA試劑盒蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISAKit小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠AZT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒 ，英文名： MCP-3/CCL7 ELISA Kit

Porcine acetylcholine (ACh) ELISA Kit 豬乙酰(ACh)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforLPAg(HumanLegionellapneumophilaaigen)ELISAKit人軍團(tuán)菌抗原規(guī)格：48T/96T

通用型CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次

ELISAKitIL-1β雞白介素1β規(guī)格：48T/96T

FOLR1重組小鼠 FOLR1 / FR-alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1 0.5mgAMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗原

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標(biāo)簽) Protein

CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LILRA5 Protein Rat 重組大鼠 LILRA5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人乳腺上皮細(xì)胞半乳糖凝集素3(GAL3)重組蛋白 Recombinant Galectin 3 (GAL3)

CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MFI2重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SIRPG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL11重組人 IL11 / Interleukin 11 / IL-11 蛋白 Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。