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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

人輸尿管上皮細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

人輸尿管上皮分離自輸尿管組織；輸尿管上接腎盂，下連膀胱，是一對細(xì)長的管道，呈扁圓柱狀，位于腹膜后，為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu)，沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進(jìn)入骨盆。輸尿管有三個狹窄部：一個在腎盂與輸尿管移行處（輸尿管起始處）；一個在越過小骨盆入口處；最后一個在進(jìn)入膀胱壁的內(nèi)部。這些狹窄是結(jié)石、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu)，即瓦耳代爾鞘，它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段，也可稱為腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動脈處；盆段，自髂動脈到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層，黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮，約有4-5層細(xì)胞；固有層由細(xì)密的結(jié)締組織構(gòu)成，內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維；輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成；外膜為疏松結(jié)締組織，營養(yǎng)血管由外膜進(jìn)入輸尿管。其中，輸尿管上皮細(xì)胞主要分布于黏膜層。

方法簡介：

公司實驗室分離的人輸尿管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人輸尿管上皮采用先消化、然后機(jī)械分離法使輸尿管分層、最后膠原酶消化，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)"，這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(C)ELISA試劑盒 96T/48T

Human septokinase (SK) ELISA Kit 人鏈激酶(SK)ELISA試劑盒

Humanypsinogen-2,y-ⅡELISAKit 人原Ⅱ(y-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenCompleme3splitproduct,C3SPELISA試劑盒雞補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CASPASE-1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MousehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISAKit小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒 ，英文名： CPSA ELISA Kit

Pig testosterone (T) ELISA Kit 豬睪酮(T)ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物Bt基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMBP(Humanmyelinbasicproteinaoaibody)ELISAKit人髓鞘堿性蛋白抗體規(guī)格：48T/96T

體液氧化型(GSSG)濃度高效液相色譜定量檢測試劑盒50次

ELISAKitET-1內(nèi)皮素1規(guī)格：48T/96T

ICAM2重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白 Protein

骨涎蛋白(BSP)重組蛋白 Recombinant Bone Sialoprotein (BSP)

EIF5A2重組人 EIF5A2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD83 Protein Human 重組人 CD83 / HB15 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD2 Protein Canine 重組狗 CD2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人輸尿管上皮細(xì)胞骨涎蛋白(BSP)重組蛋白 Recombinant Bone Sialoprotein (BSP)

CD83 Protein Human 重組人 CD83 / HB15 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ICAM2重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白 Protein

CD2 Protein Canine 重組狗 CD2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EIF5A2重組人 EIF5A2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。