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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人牙周膜干分離自牙周膜組織；牙周膜（牙周韌帶、牙周間隙）是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成。多數(shù)纖維排列成束，纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi)，另一端則埋于牙槽窩骨壁里，使牙齒固位于牙槽窩內(nèi)；牙周膜內(nèi)有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來(lái)源于胚胎時(shí)期的中胚層組織，具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能，具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力，運(yùn)用 MSCs來(lái)修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景，目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。牙周膜干細(xì)胞參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過(guò)程。現(xiàn)在，利用牙周膜干細(xì)胞建立體外模型，已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人牙周膜干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人牙周膜干采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠2(VD2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat bone specific alkaline phosphatase B (ALP-B) ELISA Kit 大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒

Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenJapaneseEncephalitisIgG,JEIgGELISA試劑盒雞流行性乙型腦炎抗體IgG(JEIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞INSULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠   英文名稱：   Cytochrome C   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Cytochrome C

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白   英文名稱：   Mouse C Reactive Protein HS   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CRP-hs

小鼠鈣蛋白   英文名稱：   Mouse Calprotectin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CP

小鼠細(xì)胞表面分子CD100   英文名稱：   Mouse cluster of differeiation 100   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CD100

人中期因子(MK)ELISA 試劑盒

People / endotoxin lipopolysaccharide (LPS) ELISA Kit 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒

Humanmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 人黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanHydrocoisone,HYDELISA試劑盒人(HYD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織肌酸激酶(CK)活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒25次

Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

IgG1重組小鼠 IgG1-Fc 蛋白 (102 Cys/Ser) Protein

CK17(Cytokeratin 17 0.5mgCK17(Cytokeratin 17) 細(xì)胞角蛋白17抗原

SERPINB4重組人 SerpinB4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CDKN2D Protein Human 重組人 CDKN2D / p19ink4d 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白

人牙周膜干細(xì)胞CK17(Cytokeratin 17 0.5mgCK17(Cytokeratin 17) 細(xì)胞角蛋白17抗原

CDKN2D Protein Human 重組人 CDKN2D / p19ink4d 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

IgG1重組小鼠 IgG1-Fc 蛋白 (102 Cys/Ser) Protein

FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白

SERPINB4重組人 SerpinB4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。