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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

兔腸道干細胞

商品屬性：

細胞簡介：

兔腸道干分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸道干細胞（ISC）也稱腸道上皮干細胞，主要位于腸黏膜隱窩內(nèi)，其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān)。正常情況下，位于隱窩基底部的腸道干細胞不斷向隱窩頂部（腸腔方向）遷移，整個遷移過程大約3-5d，在遷移過程中腸道干細胞分化形成不同的腸黏膜細胞。當受到外界生理或病理信號作用時，ISC可持續(xù)增殖、分化為成熟腸上皮細胞，如腸型細胞、杯狀細胞、內(nèi)分泌細胞和潘氏細胞等，從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。

方法簡介：

實驗室分離的兔腸道干經(jīng)MSI-1免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的兔腸道干采用-膠原酶聯(lián)合消化后，用腸道干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：懸浮

細胞形態(tài)：球形

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat plasmin aiplasmin complex (PAP) ELISA Kit 大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒

HumanLongactingthyroidstimulator,LATSELISAKit 人長效甲狀腺刺激素(LATS)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

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組織CDK7/CYCLINH激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanProteinSELISAKit人蛋白S(ProteinS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔S100A6蛋白   英文名稱：   Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   S100A6

兔可溶性細胞間黏附分子1   英文名稱：   Rabbit soluble Iercellular Adhesion Molecular 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   sICAM-1

兔基質(zhì)細胞衍化生長因子1a   英文名稱：   Rabbit Somal cell Derived Factor 1a   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   SDF1a

兔超氧化物歧化酶   英文名稱：   Rabbit Superoxide Dismase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   SOD

大鼠β淀粉樣蛋白(Aβ)ELISA試劑盒 ，英文名： Aβ ELISA Kit

Mouse adrenocoicoopic hormone (ACTH) ELISA Kit 小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠催產(chǎn)素(mouse Oxytocin) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforIL-1Beta(MouseIerleukin1Beta)ELISAKit小鼠白介素1β規(guī)格：48T/96T

通用型牛Q熱病(QFever)試劑盒20次

ELISAKitANG-Ⅱ大鼠血管緊張素Ⅱ規(guī)格：48T/96T

PPBP重組食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha 0.5mgMIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 巨噬細胞炎性蛋白3α抗原

KLK4重組人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 (His 標簽) Protein

ICOSLG Protein Human 重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (Fc 標簽)

TNFSF13 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 標簽)

兔腸道干細胞MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha 0.5mgMIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 巨噬細胞炎性蛋白3α抗原

ICOSLG Protein Human 重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (Fc 標簽)

PPBP重組食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFSF13 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 標簽)

KLK4重組人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。