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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

兔肺微血管內皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

兔肺微血管內皮分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。微血管內皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應。細胞呈梭形或多角形，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內皮細胞構成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肺微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔肺微血管內皮采用組織貼塊法并結合內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產品：

小鼠酶(CA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human follistatin (FS) ELISA Kit 人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒

Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISAKit 人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

DeerEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒內皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞鈣交換體(NCX)蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseEndothelin1,ET-1ELISAKit小鼠內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠酸性粒細胞趨化因子elisa試劑盒   小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒、小鼠酸性粒細胞趨化因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠小扁結合型甲胎蛋白elisa試劑盒   小鼠小扁結合型甲胎蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠小扁結合型甲胎蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠小扁結合型甲胎蛋白試劑盒、小鼠小扁結合型甲胎蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠表皮調節(jié)素elisa試劑盒   小鼠表皮調節(jié)素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠表皮調節(jié)素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠表皮調節(jié)素試劑盒、小鼠表皮調節(jié)素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

豚鼠神經肽Aelisa試劑盒   豚鼠神經肽A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠神經肽A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豚鼠神經肽A試劑盒、豚鼠神經肽Aeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

大鼠生長分化因子5(GDF5)ELISA試劑盒 ，英文名： GDF5 ELISA Kit

Mouse vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 小鼠K1(VK1)ELISA試劑盒

Ratai-spermaibody,AsAbELISAKit 大鼠抗抗體(AsAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHcyELISAKit大鼠同型半胱規(guī)格：48T/96T

細胞VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次

人高香草酸(HVA)ELISAKit人腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H14N5 (A/Mallard/Astrakhan(Gurjev)/263/1982) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

PARP(poly ADP-ribose polymerase 0.5mgPARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二0酸多聚酶抗原

LYN重組人 Lyn Kinase 蛋白 (GST 標簽) Protein

CHST11 Protein Human 重組人 CHST11 / C4ST-1 蛋白 (His 標簽)

BCAM Protein Human 重組人 BCAM 蛋白 (Fc 標簽)

兔肺微血管內皮細胞PARP(poly ADP-ribose polymerase 0.5mgPARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二0酸多聚酶抗原

CHST11 Protein Human 重組人 CHST11 / C4ST-1 蛋白 (His 標簽)

HA重組甲型流感 H14N5 (A/Mallard/Astrakhan(Gurjev)/263/1982) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

BCAM Protein Human 重組人 BCAM 蛋白 (Fc 標簽)

LYN重組人 Lyn Kinase 蛋白 (GST 標簽) Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。