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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

兔肺微血管內(nèi)皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

兔肺微血管內(nèi)皮分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應。細胞呈梭形或多角形，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細胞構成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肺微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔肺微血管內(nèi)皮采用組織貼塊法并結合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠酶(CA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human follistatin (FS) ELISA Kit 人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒

Humanglycosylation-dependecelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISAKit 人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

DeerEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞鈣交換體(NCX)蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseEndothelin1,ET-1ELISAKit小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠酸性粒細胞趨化因子elisa試劑盒   小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠酸性粒細胞趨化因子試劑盒、小鼠酸性粒細胞趨化因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠小扁結合型甲胎蛋白elisa試劑盒   小鼠小扁結合型甲胎蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠小扁結合型甲胎蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠小扁結合型甲胎蛋白試劑盒、小鼠小扁結合型甲胎蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠表皮調(diào)節(jié)素elisa試劑盒   小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠表皮調(diào)節(jié)素試劑盒、小鼠表皮調(diào)節(jié)素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

豚鼠神經(jīng)肽Aelisa試劑盒   豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠神經(jīng)肽A試劑盒、豚鼠神經(jīng)肽Aeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

大鼠生長分化因子5(GDF5)ELISA試劑盒 ，英文名： GDF5 ELISA Kit

Mouse vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 小鼠K1(VK1)ELISA試劑盒

Ratai-spermaibody,AsAbELISAKit 大鼠抗抗體(AsAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHcyELISAKit大鼠同型半胱規(guī)格：48T/96T

細胞VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次

人高香草酸(HVA)ELISAKit人腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H14N5 (A/Mallard/Astrakhan(Gurjev)/263/1982) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

PARP(poly ADP-ribose polymerase 0.5mgPARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二0酸多聚酶抗原

LYN重組人 Lyn Kinase 蛋白 (GST 標簽) Protein

CHST11 Protein Human 重組人 CHST11 / C4ST-1 蛋白 (His 標簽)

BCAM Protein Human 重組人 BCAM 蛋白 (Fc 標簽)

兔肺微血管內(nèi)皮細胞PARP(poly ADP-ribose polymerase 0.5mgPARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二0酸多聚酶抗原

CHST11 Protein Human 重組人 CHST11 / C4ST-1 蛋白 (His 標簽)

HA重組甲型流感 H14N5 (A/Mallard/Astrakhan(Gurjev)/263/1982) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

BCAM Protein Human 重組人 BCAM 蛋白 (Fc 標簽)

LYN重組人 Lyn Kinase 蛋白 (GST 標簽) Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。