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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

兔腹腔巨噬細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔腹腔巨噬分離自腹腔；腹腔，即軀干腹部的腔，內(nèi)襯腹膜，由體壁、橫膈膜和盆底圍成，其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內(nèi)臟器官。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長(zhǎng)期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。巨噬細(xì)胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點(diǎn)問題之一；腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹腔巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹腔巨噬采用反復(fù)往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒

Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Deererythrocytemembraneprotein,EMPELISA試劑盒紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞脘蛋白(PRION)蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠酸性成纖維生長(zhǎng)因子(mouse a-FGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(mouse b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin）   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠Flt3(mouse Flt3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

大鼠生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ(GROγ)ELISA試劑盒 ，英文名： GROγ ELISA Kit

Mouse vitamin E (VE) ELISA Kit 小鼠(VE)ELISA試劑盒

RatHistamine,HISELISAKit 大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHDELISAKit大鼠組織蛋白去乙酰化酶規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞VEGFR1(FLT-1)激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitα-BGTα-銀環(huán)蛇毒素規(guī)格：48T/96T

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)

CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白 (His 標(biāo)簽)

兔腹腔巨噬細(xì)胞降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)

CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。