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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔肝內(nèi)膽管上皮分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。通過(guò)控制激素調(diào)控的分泌和吸收，在保持、調(diào)整和擴(kuò)大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用，肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞在先天性和獲得性免疫應(yīng)答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞約占肝細(xì)胞總數(shù)的5%，其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復(fù)雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞具有復(fù)雜的生理代謝功能，參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過(guò)程，在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起一定的作用。研究表明，常見(jiàn)的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病，都是以肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞為病變靶位，進(jìn)而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此，了解正常肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的病理特征對(duì)研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機(jī)制、診斷和治療具有重要意義。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝內(nèi)膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠羧甲基賴酸(CML)ELISA試劑盒 96T/48T

Human ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒

HumanIerleukin1βconveingenzyme,ICEELISAKit 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

DeerInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISA試劑盒胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠廋素   英文名稱：   Leptin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   Leptin

小鼠廋素受體   英文名稱：   Leptin receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   Leptin R

小鼠促黃體生成激素   英文名稱：   leinizing hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   LH

小鼠   英文名稱：   Lysozyme   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   Lysozyme

大鼠生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6(GAS6)ELISA試劑盒 ，英文名： GAS6 ELISA Kit

Mouse vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 小鼠3(VD3)ELISA試劑盒

RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHD(MouseHistoneDeacetylase)ELISAKit小鼠組織蛋白去乙?；敢?guī)格：48T/96T

細(xì)胞TUNEL顯色法(DAB)測(cè)定試劑盒10/20次

ELISAKitLCA扁豆凝集素規(guī)格：48T/96T

IL11RA重組小鼠 IL11RA / IL11Rα 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD117/c-kit/SCFR 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原(抗原 0.5mgCD117/c-kit/SCFR 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原(抗原)

FTL重組人 FTL / ferritin, light polypeptide 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CIB2 Protein Human 重組人 CIB2 / KIP-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LAYN Protein Rat 重組大鼠 Layilin / LAYN 蛋白

兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞CD117/c-kit/SCFR 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原(抗原 0.5mgCD117/c-kit/SCFR 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原(抗原)

CIB2 Protein Human 重組人 CIB2 / KIP-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL11RA重組小鼠 IL11RA / IL11Rα 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

LAYN Protein Rat 重組大鼠 Layilin / LAYN 蛋白

FTL重組人 FTL / ferritin, light polypeptide 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用