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上海莼試生物技術有限公司
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所在地
上海市
更新時間:2024-10-04 11:11:44瀏覽次數:67
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原代細胞VS細胞系:
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關),再加上取材,成本等因素,通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。
商品屬性:
組織來源 | 腦 | 產品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
產品貨號 | CS-X3789 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介:
兔三叉神經星形膠質分離自三叉神經組織;三叉神經為粗大的混合性腦神經,含一般軀體感覺和特殊內臟運動兩種纖維。其特殊內臟運動纖維起于腦橋中段的三叉神經運動核,纖維組成三叉神經運動根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺根下內側,后進入三叉神經第3支下頜神經中,經卵圓孔出顱,隨下頜神經分支分布于咀嚼肌等。運動根內還含有三叉神經中腦核有關的纖維,主要傳導咀嚼肌的本體感覺。三叉神經內以軀體感覺神經纖維為主,這些纖維的細胞體位于三叉神經節(jié)(半月節(jié))內,該神經節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。神經膠質細胞是神經組織中除神經元以外的另一大類細胞,也有突起,但無樹突和軸突之分,廣泛分布于中樞和周圍神經系統(tǒng)。在哺乳類動物中,神經膠質細胞與神經元的細胞數量比例約為10:1。在中樞神經系統(tǒng)(CNS)中的神經膠質細胞主要有星形膠質細胞、少突膠質細胞(與前者合稱為大膠質細胞)和小膠質細胞等。傳統(tǒng)認為膠質細胞屬于結締組織,其作用僅是連接和支持各種神經成分,其實神經膠質還起著分配營養(yǎng)物質、參與修復和吞噬的作用,在形態(tài)、化學特征和胚胎起源上都不同于普通結締組織。星形膠質前體細胞主要表達Vimentin,而成熟之后表達Vimentin和膠質纖維酸性蛋白(GFAP),故GFAP被認為是星形膠質細胞成熟的標志物。
方法簡介:
實驗室分離的兔三叉神經星形膠質經GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測:
實驗室分離的兔三叉神經星形膠質采用消化法結合差速貼壁法篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞一般傳至10代左右,大部分細胞衰老死亡,但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去,存活的細胞一般能夠傳到40-50代,叫細胞株。當50代以后又會出現“危機",這時有部分細胞的遺傳物質發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c,從而可能無限制地傳代下去,稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系,因此,細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞,廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點,也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
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BID重組小鼠 BID 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質激素(18-39)(抗原)
CABP5重組人 CABP3 / CABP5 蛋白 (His 標簽) Protein
IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白
IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白 (His 標簽)
兔三叉神經星形膠質細胞催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)
IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白
WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 (His 標簽) Protein
NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標簽)
BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽) Protein
原代細胞培養(yǎng)的具體步驟:
1、準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8、培養(yǎng):置于37℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。