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本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔真皮微血管內(nèi)皮分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細(xì)胞（MEC）在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長(zhǎng)、創(chuàng)面愈合過(guò)程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域，由于表皮細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟，人們對(duì)這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。與之相比，對(duì)參與創(chuàng)面愈合過(guò)程的另一種主要細(xì)胞——真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞，則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。

原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔真皮微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔真皮微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用

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豚鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-Ⅱ ELISA Kit

Human proteolipid protein (PLP) ELISA Kit 人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒

Monkeyacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit乙酰受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBMG/Beta2-MG(HumanBeta2-microglobulin)ELISAKit人β2微球蛋白規(guī)格：48T/96T

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RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡELISAKit兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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CTAB   250g

5’-三0酸胞苷三鹽   50mg

CTP   100mg

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RatvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGM-CSFAb(Humanai-Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactoraibody)ELISAKit人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體規(guī)格：48T/96T

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F7 Protein Mouse 重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

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