上海莼試生物技術(shù)有限公司
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上海市
更新時(shí)間:2024-10-06 08:51:31瀏覽次數(shù):34
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 支氣管 |
---|---|---|---|
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
原代細(xì)胞VS細(xì)胞系:
用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說,從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞,絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。
商品屬性:
組織來源 | 支氣管 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | CS-X3679 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞簡介:
兔支氣管上皮分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。支氣管上皮細(xì)胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機(jī)制中均起著重要的作用。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔支氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔支氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合機(jī)械刮刷并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細(xì)胞一般傳至10代左右,大部分細(xì)胞衰老死亡,但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去,存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代,叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)",這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),從而可能無限制地傳代下去,稱為細(xì)胞系。
也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系,因此,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞,廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。
細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn),也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。
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SOST重組人 Sclerostin / SOST 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
纖維介素蛋白(FGL2)重組蛋白 Recombinant Fibrinogen Like Protein 2 (FGL2)
PRND重組人 PRND / Prion protein 2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
HPGD Protein Human 重組人 HPGD / 15-PGDH 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
兔支氣管上皮細(xì)胞纖維介素蛋白(FGL2)重組蛋白 Recombinant Fibrinogen Like Protein 2 (FGL2)
HPGD Protein Human 重組人 HPGD / 15-PGDH 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SOST重組人 Sclerostin / SOST 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PRND重組人 PRND / Prion protein 2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟:
1、準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩O瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng):置于37℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時(shí)需要換新塞。