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原代細胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行，以促進細胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

小鼠胚胎干分離自囊胚胚胎組織；胚胎干細胞（Embryonic stem cell，ESCs，簡稱ES、EK或ESC細胞）是早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來的一類細胞，它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境，ES細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型。進一步說，胚胎干細胞（ES細胞）是一種高度未分化細胞。它具有發(fā)育的全能性，能分化出成體動物的所有組織和器官，包括生殖細胞。ES細胞具有與早期胚胎細胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu)，細胞核大，有一個或幾個核仁，胞核中多為常染色質(zhì)，胞質(zhì)胞漿少，結(jié)構(gòu)簡單。體外培養(yǎng)時，細胞排列緊密，呈集落狀生長。用堿性磷酸酶染色，ES細胞呈棕紅色，而周圍的成纖維細胞呈淡黃色。細胞克隆和周圍存在明顯界限，形成的克隆細胞彼此界限不清，細胞表面有折光較強的脂狀小滴。細胞克隆形態(tài)多樣，多數(shù)呈島狀或巢狀。小鼠ES細胞的直徑7 微米～18 微米，豬、牛、羊ES細胞的顏色較深，直徑12 微米～18 微米。胚胎干細胞與普通細胞有顯著差別，有其特定的生長特性和特定的標志，例如堿性磷酸酶活性非常高，帶有胚胎階段特異性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA），人類胚胎干細胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等標志，這些特性和標志均可以用于對胚胎干細胞進行鑒定，除此之外，胚胎干細胞還可以在體外傳代，并保持正常核型。在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層（MEF）上培養(yǎng)時，胚胎干細胞都能呈克隆性增殖，長期保持核型正常和穩(wěn)定，凍存解凍也不影響不分化的特性。另外，胚胎干細胞還表現(xiàn)岀高水平端粒酶活性，目前證明端粒酶與細胞衰老密切相關，多數(shù)成熟細胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細胞與成熟細胞不同的重要特點，也可能是其復制生命期限遠比體細胞長的原因。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠胚胎干經(jīng)Oct-4免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠胚胎干采用分離囊胚組織，去除胚胎透明帶、使用特制專用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng)，消化傳代純化制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次；

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 短梭形、多角形

傳代特性 可傳5-8代左右

消化液 0.025%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA 試劑盒 96T/48T

Fro of the human aial naiuretic peptide (Pro-ANP) ELISA Kit 人前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒

HumanUbiquitin,UbELISAKit 人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanadrenomedullin,ADMELISA試劑盒人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物mRNA直接化試劑盒10次

MouseActivinA,ACV-AELISAKit小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒 ，英文名： 2,3-DPG ELISA Kit

Mouse parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒

Mouseheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanProinsulin,PIELISAKit人胰島素原規(guī)格：48T/96

通用型豬胸膜肺炎感染(Actinobacilluspleuropneumoniae;App)試劑盒20次

ELISAKiteNOS大鼠內(nèi)皮型合成酶規(guī)格：48T/96

CD34重組人 CD34 蛋白 (His 標簽) Protein

0脂酶A1(PLA1)重組蛋白 Recombinant Phospholipase A1 (PLA1)

INSL4重組人 INSL4 / EPIL 蛋白 (His 標簽) Protein

DCN Protein Human 重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 (His 標簽)

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

小鼠胚胎干細胞0脂酶A1(PLA1)重組蛋白 Recombinant Phospholipase A1 (PLA1)

DCN Protein Human 重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 (His 標簽)

CD34重組人 CD34 蛋白 (His 標簽) Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

INSL4重組人 INSL4 / EPIL 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用