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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠破骨細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠破骨分離自骨組織和骨髓；破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng)，其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡，若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機(jī)制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞，屬于不增殖細(xì)胞群，不能增殖和傳代，只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時間較短。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠破骨經(jīng)TRAP染色檢測，純度可達(dá)30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠破骨采用機(jī)械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 多核巨細(xì)胞

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)"，這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hydroxyproline (Hyp) ELISA Kit 人羥脯(Hyp)ELISA試劑盒

Humanai-thymocyteglobulin,ATGELISAKit 人抗細(xì)胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAgrinELISA試劑盒人聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MouseADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-1(mouse MMP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進(jìn)口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2(mouse MMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進(jìn)口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-3(mouse MMP-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進(jìn)口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9(mouse MMP-9)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96   進(jìn)口分裝

大鼠α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒 ，英文名： α-SMA ELISA Kit

Mouse oxytocin (OT) ELISA Kit 小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠血小板源生長因子-BB(mouse PDGF-BB) 48T/96 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIgMELISAKit大鼠免疫球蛋白M規(guī)格：48T/96

通用型牛布氏桿菌(Brucellaabous)試劑盒20次

大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit，48T/96大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit，48T/96規(guī)格：48T/96

ICOS重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1 0.5mgED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原

HDAC3重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

DCX Protein Human 重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標(biāo)簽)

JAM3 Protein Mouse 重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠破骨細(xì)胞ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1 0.5mgED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原

DCX Protein Human 重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標(biāo)簽)

ICOS重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

JAM3 Protein Mouse 重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HDAC3重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。