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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠氣管上皮分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái)，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性，因此，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hydroxy pyridinium crosslinks (OH-PYD) ELISA Kit 人羥基膠原交聯(lián)(OH-PYD)ELISA試劑盒

HumanCryoglobulin,CGELISAKit 人冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanaldosterone,ALDELISA試劑盒人固同(ALD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物V型ATP酶(VtypeATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mouse5-Nucleotidase,5-ELISAKit小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠環(huán)0酸腺苷(mouse cAMP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠環(huán)0酸鳥苷(mouse cGMP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(mouse CF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

大鼠B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)ELISA試劑盒 ，英文名： NFKBIE ELISA Kit

Mouse osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit 小鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒

MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumahyroxineT4ELISAKit人甲狀腺素規(guī)格：48T/96T

通用型鴨氏菌(SE)試劑盒20次

ELISAKitCACT大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶規(guī)格：48T/96T

BCAM重組大鼠 BCAM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白

EPHB1重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

DDR2 Protein Human 重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (aa 422-855, His & GST 標(biāo)簽)

MMP9 Protein Mouse 重組小鼠 MMP-9 蛋白

小鼠氣管上皮細(xì)胞GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白

DDR2 Protein Human 重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (aa 422-855, His & GST 標(biāo)簽)

BCAM重組大鼠 BCAM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MMP9 Protein Mouse 重組小鼠 MMP-9 蛋白

EPHB1重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用