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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

?小鼠腎小球內(nèi)皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠腎小球內(nèi)皮分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內(nèi)皮細胞是一類特殊微血管類型的細胞。細胞為圓形、多角形，單層貼壁生長；細胞質(zhì)豐富，細胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細胞被覆于腎小球毛細血管壁腔側(cè)，與血流直接接觸，是腎小球濾過膜的道屏障，可粘附細菌和白細胞，修復基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細胞在免疫學和病理生理學領域中具有重要的研究價值。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠腎小球內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠腎小球內(nèi)皮采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化，結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒

HumanEuglobulinLysis,ELELISAKit 人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAngiopoietin1,ANG-1ELISA試劑盒人血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物脯(proline)含量比色法定量檢測試劑盒20次

LHELISAKit魚促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠骨成型蛋白7   英文名稱：   Mouse Bone Morphogenetic Protein 7   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BMP7

小鼠B淋巴細胞刺激因子   英文名稱：   B lymphocyte stimulator   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BAFF

小鼠凋亡因子BAX   英文名稱：   apoptogen BAX   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BAX

小鼠細胞凋亡相關基因BCL-2   英文名稱：   Cell appoptosis inhibitory BCL-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BCL-2

大鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 ，英文名： LN ELISA Kit

Mouse N- acetyl - seryl - aspayl -- lysyl - proline (AcSDK 小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDK

ELISA 小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforLC1(Humanai-livercytosolaibodytype1)ELISAKit人抗肝細胞胞質(zhì)1型抗體規(guī)格：48T/96T

通用型vero毒素大腸桿菌志賀氏毒素-1(VTEC-Shigatoxin1)試劑盒20次

ELISAKitBV猴B病毒規(guī)格：48T/96T

THOP1重組小鼠 THOP1 蛋白 (His 標簽) Protein

S100鈣結(jié)合蛋白(S100)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein (S100)

KLRK1重組人 NKG2D / CD314 蛋白 (aa 78-216, His 標簽) Protein

DSC2 Protein Human 重組人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 (His 標簽)

EPCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 標簽)

小鼠腎小球內(nèi)皮細胞防御素β103B(DEFβ103B)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 103B (DEFB103B)

DSC2 Protein Human 重組人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 (His 標簽)

FIGF重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標簽) Protein

IGFBP1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP1 蛋白 (His 標簽)

BIRC5重組人 Survivin / BIRC5 / API4 蛋白 Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。