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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞，亦稱為成血管細(xì)胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示，內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路，EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn)。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血來源內(nèi)皮祖經(jīng)CD34免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血來源內(nèi)皮祖采用采集外周血、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代；不建議多次傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2/CXCL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human lysosomal associated membrane protein 2 (HLAMP-2) ELISA Kit 人溶酶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒

HumanMaixGlaProtein,MGPELISAKit 人基質(zhì)γ羧基谷蛋白(MGP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-albuminaibody,AAAELISA試劑盒人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物果膠甲酯酶(pectinmethylesterase;PME)活性熒光定量檢測試劑盒20次

Humanβcatenin，β-CatELISAKit人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠5羥二十碳四烯酸(5-HETE)ELISA試劑盒 ，英文名： 5-HETE ELISA Kit

Mouse maix metalloproteinase 8/ neuophil collagenase (MMP-8) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒

MouseHydrocoisone,HYDELISAKit 小鼠輕化1(HYD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體規(guī)格：48T/96T

通用型豬傳染性胃腸炎/豬呼吸(TGEV/PRCV)試劑盒20次

ELISAKituPA大鼠型纖溶酶原激活物規(guī)格：48T/96T

CTSB重組小鼠 Cathepsin B / CTSB 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42 0.1mgA Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β淀粉樣肽29-42(野生型)

SCN3B重組人 SCN3B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

EDA2R Protein Human 重組人 XEDAR / EDA2R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TNFRSF11A Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF11A 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42 0.1mgA Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β淀粉樣肽29-42(野生型)

EDA2R Protein Human 重組人 XEDAR / EDA2R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CTSB重組小鼠 Cathepsin B / CTSB 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

TNFRSF11A Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF11A 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SCN3B重組人 SCN3B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用