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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠微血管周細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠微血管周分離自微血管組織；周細(xì)胞（pericyte）又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞，是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞，可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中，通過物理接觸和旁分泌信號與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊，監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外，周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一，所以對血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個基膜，基膜上有多種細(xì)胞連接，包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控；毛細(xì)血管受損時，周細(xì)胞還可增殖，分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠微血管周經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠血管周采用膠原酶-聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)"，這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human milk ansferrin / lactoferrin (LF/LTF) ELISA Kit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

Humahioredoxin,xELISAKit 人硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-Bactericidalpermeabilityincreasingproteinaibody,BPI-AbELISA試劑盒人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物過氧化氫酶(CATALASE)催化活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humanα-Smoothmuscleactin,α-SMAELISAKit人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠多巴胺(mouse Dopamine)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠氧化酶(mouse DAO)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠D-二聚體(mouse D-Dimer)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 ，英文名： 6-K-PG ELISA Kit

Mouse maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒

MouseHomocysteicacid,HcyELISAKit 小鼠同型半胱(Hcy)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanschistosomaELISAKit人血吸蟲規(guī)格：48T/96T

通用型植物線粒體DNA萃取試劑盒10/20次

ELISAKitTAT大鼠抗復(fù)合物規(guī)格：48T/96T

HA重組甲型流感 H11N9 (A/mallard/Alberta/294/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22) ?？窠?jīng)毒素(35肽)

S100A11重組人 S100A11 / S100C 蛋白 Protein

EDNRB Protein Human 重組人 EDNRB / Endothelin B Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

KLK13 Protein Human 重組人 KLK13 / Kallikrein-13 蛋白

小鼠微血管周細(xì)胞ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22) ?？窠?jīng)毒素(35肽)

EDNRB Protein Human 重組人 EDNRB / Endothelin B Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H11N9 (A/mallard/Alberta/294/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

KLK13 Protein Human 重組人 KLK13 / Kallikrein-13 蛋白

S100A11重組人 S100A11 / S100C 蛋白 Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。