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原代細胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行，以促進細胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

小鼠胰腺星狀分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細胞，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達Desmin蛋白，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白（alpha-SMA）。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種，并分別具有特異的標志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的A脂滴可以被油紅O染成紅色，陽性表達Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn)，原代分離的細胞培養(yǎng)6d，胞漿中仍可見明顯的脂滴，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學(xué)染色顯示，細胞接種24h仍然表達Desmin，48h后Desmin基本不再表達。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細胞開始表達alpha-SMA，隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加，細胞表達alpha-SMA，而不再表達Desmin，說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細胞激活，傳代后細胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化，導(dǎo)致細胞形態(tài)、功能發(fā)生變化，促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀采用膠原酶制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Salmonella typhi aigen (St-Ag) ELISA Kit 人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒

Humanlatemembraneprotein-1,LMP-1ELISAKit 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-glycoproteinaibody,GPELISA試劑盒人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物亮(leucine)含量比色法定量檢測試劑盒20次

HumanvisfatinELISAKit人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠脫氫酶E1(PDHE1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠高敏狀腺原酸(u-T3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠肝素(HS)ELISA試劑盒 ，英文名： HS ELISA Kit

Mouse islet cell aibody (ICA) ELISA Kit 小鼠胰島細胞抗體(ICA)ELISA試劑盒

Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISAKit 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforG-CSFELISAKit大鼠粒細胞集落刺激因子規(guī)格：48T/96T

細胞谷草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

FCGR2A重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His 標簽) Protein

MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28 0.5mgMrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28) 線粒體核糖體蛋白L28(抗原)

BLMH重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標簽) Protein

EPDR1 Protein Human 重組人 EPDR1 蛋白 (His 標簽)

TF Protein Mouse 重組小鼠 Transferrin / CD176 / Serotransferrin 蛋白 (Fc 標簽)

小鼠胰腺星狀細胞MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28 0.5mgMrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28) 線粒體核糖體蛋白L28(抗原)

EPDR1 Protein Human 重組人 EPDR1 蛋白 (His 標簽)

FCGR2A重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His 標簽) Protein

TF Protein Mouse 重組小鼠 Transferrin / CD176 / Serotransferrin 蛋白 (Fc 標簽)

BLMH重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用