兔腫瘤壞死因子α酶聯(lián)免疫試劑盒【工作原理】
Tumor necrosis factor α，TNFα，腫瘤壞死因子α。TNFα前體是以跨膜蛋白的形式存在于細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞外被剪切成17KDa的成熟形態(tài)（157個(gè)氨基酸）?；钚缘腡NFα以非共價(jià)鍵二聚體、三聚體甚至五聚體的形式存在，但在SDS-PAGE顯示為單一17KDa條帶。很多細(xì)胞都能合成TNFα，包括各種免疫細(xì)胞（單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T、B細(xì)胞、粒細(xì)胞、NK細(xì)胞）和非免疫細(xì)胞（上皮細(xì)胞、纖維細(xì)胞、肌細(xì)胞、Kuppfer細(xì)胞等）。TNFα的合成受到很多因素的影響。其生理功能zui早認(rèn)為是有抗腫瘤活性，現(xiàn)在已明確不僅能調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長，對很多細(xì)胞的生長、分化和代謝都有影響。TNFα是免疫宿主反應(yīng)的快速反應(yīng)因子。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的兔TNFa抗體為多克隆兔TNFa抗體。檢測相兔TNFa抗體也為多克隆兔TNFa抗體，經(jīng)*（biotin）標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記兔TNFa抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
兔腫瘤壞死因子α酶聯(lián)免疫試劑盒【每套試劑盒中內(nèi)容】(96T)
材料 數(shù)量
兔TNFa標(biāo)準(zhǔn)品 96T(2vial)
預(yù)包被兔TNFa抗體的96孔板 96T（8×12）
*標(biāo)記兔TNFa抗體 96T (1:100)
ABC（親和素-過氧化物酶復(fù)合物） 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
兔TNFa抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)
兔腫瘤壞死因子α酶聯(lián)免疫試劑盒【需要而未提供的試劑和器材】
1． 37℃恒溫箱。
2． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3． 自動(dòng)洗板機(jī)。
4． 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
5． 蒸餾水，容量瓶等
6． 干凈的試管和Eppendof管。
環(huán)保在線