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上海邦景實業(yè)有限公司
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ELISA捕獲法測IgM抗體操作步驟
2023-5-8 閱讀(100)
血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在，后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗本多用捕獲法，先將所有血清IgM（包括異性IgM和非特異性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再測定特異性IgM。操作步驟如下：
1、將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM。洗滌。
2、加入稀釋的血清標(biāo)本：保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。
3、加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。
4、加入針對特異性的酶標(biāo)抗體：使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合。洗滌。
5、加底物顯色：如有顏色顯示，則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在，是為陽性反應(yīng)。
