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上海邦景實業(yè)有限公司
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更新時間：2022-05-19 11:02:24瀏覽次數(shù)：374
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商品介紹：
名稱 DC細胞
產(chǎn)品概述
DC細胞，即樹突狀細胞（Dendritic Cell）是正常人體內存在的一種具有大的抗原提呈功能的一類特殊的細胞，被喻為機體的“天然佐劑"。2011年10月3日，瑞典卡羅琳醫(yī)學院在斯德哥爾摩宣布，2011年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予加拿大科學家拉爾夫·斯曼、生于盧森堡的法國籍科學家朱爾斯·霍夫曼以及美國科學家布魯斯·博伊特勒，以表彰他們在免疫學領域取得的革命性研究成果。其中，斯曼(RalphM·Steinman)教授，因其在免疫系統(tǒng)領域以及樹突狀細胞(Dendritic cell簡稱DC)等一系列研究發(fā)現(xiàn)，獨享獎金的一半，另外一半由其他兩位科學家分享。被譽為“DC細胞之父"的斯曼教授在2006年就查出胰腺癌晚期。在醫(yī)學上，晚期胰腺癌的惡化程度高，生存期不會超過6個月。然而，斯曼教授正是在接受了以他自己的研究成果“樹突細胞"(DC細胞)為依據(jù)的細胞免疫治療后，成功地將生命延長。
DC細胞抗腫瘤機制如下：
a)DC可以高表達MHC-Ⅰ類和MHC-Ⅱ類分子，MHC分子與其捕獲加工的腫瘤抗原結合，形成肽-MHC分子復合物，并遞呈給T細胞，從而啟動MHC-I類限制性CTL反應和MHC-Ⅱ類限制性的CD4+Thl反應。同時，DC還通過其高表達的共刺激分子(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40等)提供T細胞活化所必須的第二信號，啟動了免疫應答。
b)DC與T細胞結合可大量分泌IL-12、IL-18激活T細胞增殖，誘導CTL生成，主導Th1型免疫應答，利于腫瘤清除；激活穿孔素P顆粒酶B和FasL/Fas介導的途徑增NK細胞毒作用；
c)DC分泌趨化因子(Chemotactic Cytokines，CCK)專一趨化初始型T細胞促進T細胞聚集，增了T細胞的激發(fā)。保持效應T細胞在腫瘤部位長期存在，可能通過釋放某些抗血管生成物質(如IL-12、IFN-γ)及前血管生成因子而影響腫瘤血管的形成。上述CCK進一步以正反饋旁分泌的方式活化DC，上調IL-12及CD80、CD86的表達；同時DC也直接向CD8+T細胞呈遞抗原肽，在活化的CD4+T細胞輔助下使CD8+T細胞活化，CD4+和CD8+T細胞還可以進一步通過分泌細胞因子或直接殺傷，增機體抗腫瘤免疫應答。
DC刺激免疫反應有以下特點：
1.樹突狀細胞（DC)是人體內功能的專職抗原遞呈細胞，DC相當于信使，將抗原信息傳遞給T細胞，并具有活化T細胞的功能，很少量就可以激發(fā)大的T細胞反應。
2.可致敏輔助T細胞的多種細胞因子，顯著刺激初始型T細胞增殖，以激活體內靜止狀態(tài)的初始型T細胞（而巨噬細胞、B細胞僅能刺激已活化的或記憶性T細胞）。
3.幫助重建腫瘤患者對腫瘤細胞的免疫監(jiān)視功能。機體的免疫系統(tǒng)具有完備的監(jiān)視功能，但腫瘤細胞對機體的免疫系統(tǒng)有抵抗和抑制作用，使得免疫細胞不能識別和殺傷腫瘤細胞。在DC疫苗培養(yǎng)中用腫瘤抗原誘導DC使其致敏后，可將其抗原信息傳遞給T細胞，使T細胞重新識別和殺傷腫瘤細胞。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 免疫細胞及干細胞 | BJ-X97749 |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
| 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
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齒雙歧桿菌 海洋海棲菌
克柔念珠菌ATCC6258凍干粉 白僵菌
戴爾根霉 威爾酵母
立枯多核菌 真線側耳
大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa分析檢測試劑盒
大鼠單胺氧化酶(MAO)elisa分析檢測試劑盒
大鼠大內皮素1elisa分析檢測試劑盒
大鼠催乳素(PRL)elisa分析檢測試劑盒
大鼠催產(chǎn)素(OT)elisa分析檢測試劑盒
DC細胞氧化酶（XOD）測試盒
氧化酶（XOD）試劑盒
氧化酶EC1.17.3.2 1 KU/瓶
氧化酶XOD測試盒 50管/48樣 比色法
活細胞/死細胞雙染試劑盒1000T
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