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蛋白折疊試劑盒

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更新時(shí)間：2018-06-15 13:34:44瀏覽次數(shù)：257次

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  分子生物學(xué)

重組蛋白

工具酶

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核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

蛋白折疊試劑盒本產(chǎn)品提供使用矩陣方法來(lái)確定重組蛋白重折疊的緩沖體系，其中，重組蛋白是通過從包涵體中變性、溶解得到的。基礎(chǔ)緩沖體系所形成的矩陣中包含了防止蛋白聚集的強(qiáng)和弱的變性條件。并且可以根據(jù)重折疊的蛋白類型的不同向其中加入額外的矩陣因子（詳情見下表）?？梢詸z測(cè)三個(gè)濃度水平的緩沖液成分，因此可以在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中測(cè)試多種重折疊條件?？烧{(diào)節(jié)的設(shè)計(jì)確保能夠篩選出針對(duì)目標(biāo)蛋白的特定重折疊條件，防止浪費(fèi)樣品和進(jìn)

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蛋白折疊試劑盒

名稱	規(guī)格	價(jià)格	手冊(cè)
蛋白折疊試劑盒	100次	詢價(jià)

本產(chǎn)品提供使用矩陣方法來(lái)確定重組蛋白重折疊的緩沖體系，其中，重組蛋白是通過從包涵體中變性、溶解得到的?；A(chǔ)緩沖體系所形成的矩陣中包含了防止蛋白聚集的強(qiáng)和弱的變性條件。并且可以根據(jù)重折疊的蛋白類型的不同向其中加入額外的矩陣因子（詳情見下表）?？梢詸z測(cè)三個(gè)濃度水平的緩沖液成分，因此可以在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中測(cè)試多種重折疊條件?？烧{(diào)節(jié)的設(shè)計(jì)確保能夠篩選出針對(duì)目標(biāo)蛋白的特定重折疊條件，防止浪費(fèi)樣品和進(jìn)行不必要的分析，同時(shí)可以大化重折疊的產(chǎn)量。蛋白重折疊試劑盒中有一份詳盡的重折疊指南，其中包括分離、溶解和純化包涵體的詳細(xì)信息；優(yōu)化重折疊條件的詳細(xì)信息；以及分析重折疊收率的詳細(xì)信息。每種基礎(chǔ)重折疊緩沖液均以1.1X儲(chǔ)備液的形式提供。每種儲(chǔ)備液均含有濃度的變性劑以及55 mM Tris、21 mM NaCl、0.88 mM KCl，pH為 8.2。加入增溶的蛋白樣品會(huì)額外的引入胍(鹽酸胍)。

客戶可根據(jù)其需要從提供的添加劑中挑選因子3和因子4來(lái)制備定制的重折疊條件。表中的數(shù)字表明不同添加劑的濃度水平。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 可靠，所檢測(cè)的條件和成分均為重折疊緩沖液中常用、重要的。

2. 方便，三個(gè)水平的矩陣設(shè)計(jì)明顯地降低第二次優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析的難度。

3. 可調(diào)節(jié)，可以按照不同的目標(biāo)蛋白定制不同的重折疊實(shí)驗(yàn)；詳細(xì)說(shuō)明了緩沖液成分之間的正向和反向的相互作用，避免了不必要的分析。

4. 高純?cè)噭?，按照極其嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)配制試劑，因此可以獲得穩(wěn)定的結(jié)果。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
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