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CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒

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更新時間：2018-06-19 14:38:17瀏覽次數(shù)：319次

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產(chǎn)品簡介

CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒本試劑盒是基于WST-8的第二代細(xì)胞增殖及毒性檢測產(chǎn)品，主要成分為水溶性四唑鹽WST-8 （2-（2-甲氧基-4-硝苯基）-3-（4-硝苯基）-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽），WST-8為一種MTT類似物，在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下能夠被還原成橙黃色水溶性的甲臜（formazan）。生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成線性相關(guān)。與第

詳細(xì)介紹

CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒

名稱	規(guī)格	價格	手冊
CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒	5mL	詢價

本試劑盒是基于WST-8的第二代細(xì)胞增殖及毒性檢測產(chǎn)品，主要成分為水溶性四唑鹽WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)，WST-8為一種MTT類似物，在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下能夠被還原成橙黃色水溶性的甲臜 (formazan)。生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成線性相關(guān)。與*代試劑盒相比，它具有下列特點(diǎn)：
1. 溶液穩(wěn)定，對細(xì)胞無毒性，可直接同步加入到細(xì)胞樣品中長時間孵育，可以多次測定選取測定時間。
2. 靈敏度高，操作簡便、快捷，實(shí)驗結(jié)果重復(fù)性好。
3. 水溶性，免去后續(xù)的溶解步驟。
4. 不需要換液，尤其適合于懸浮細(xì)胞。
5. 安全無毒，不會對操作人員身體造成危害。
6. 可以廣泛應(yīng)用于生物活性因子的活性檢測、藥物的篩選、細(xì)胞增殖檢測、細(xì)胞毒性測定及腫瘤藥敏等實(shí)驗。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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