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上海博湖生物科技有限公司
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如何提取病毒核酸技術(shù)
2020-1-3 閱讀(2118)
提取病毒核酸的試劑盒和方法技術(shù)其特征在于，包括裂解液、結(jié)合液、第yi漂洗液、第二漂洗液、洗脫液、二氧化硅磁珠、蛋白酶K和核酸助沉劑，其中，所述第yi漂洗液含有所述結(jié)合液和檸檬酸鈉。
核酸的提取純化是進(jìn)行分子生物學(xué)各項(xiàng)研究的基礎(chǔ)，特別是在分子診斷領(lǐng)域，PCR、RT-PCR、Northernblot、RT-qPCR、cDNA文庫(kù)構(gòu)建、酶切等技術(shù)手段都需要純度高、完整性好的核酸。但由于外源及內(nèi)源性核酸酶的存在及其酶活性相當(dāng)穩(wěn)定等原因，使得提取和純化高質(zhì)量的核酸相對(duì)比較困難。核酸提取試劑配方對(duì)核酸的質(zhì)量和得率有很大的影響，因此研發(fā)高效快速、回收范圍廣、得率高的核酸提取試劑是本領(lǐng)域不斷探索的課題。磁珠法作為近年來興起的新型核酸提取方法，主要原理是基于磁性納米材料一在高鹽環(huán)境下對(duì)核酸進(jìn)行特異性的吸附，經(jīng)過磁性分離和漂洗雜質(zhì)后，在低鹽溶液中被洗脫下來，從而達(dá)到對(duì)核酸進(jìn)行提取純化的目的。
試劑盒目前市場(chǎng)上用于核酸提取的裂解液種類較多，常見的有經(jīng)典的TRIzol、CATB-LiCl、堿裂解液等。TRIzol含有、異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速破碎細(xì)胞并抑制細(xì)胞內(nèi)源性核酸酶，保持提取核酸的完整性；但是其用時(shí)操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，提取樣本中核酸的質(zhì)量不佳。
