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游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)

2020-7-27  閱讀(1291)

游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣

2.加樣:分別設(shè)空白孔空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl樣品終稀釋度為5倍。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將3048t的20倍倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048t的20倍倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。

11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度od值。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

 

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