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上海博湖生物科技有限公司
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導致細胞生長緩慢的常見原因
2021-9-24 閱讀(2684)
導致細胞生長緩慢的常見原因：
一、培養(yǎng)基可能缺乏細胞生長所需的某種因子，出現(xiàn)這種情況一般都是小伙伴們購買細胞后沒有按照ATCC或國內(nèi)細胞庫的方法配制培養(yǎng)基，就使用實驗室?guī)熜謳熃阌玫呐囵B(yǎng)基去養(yǎng)細胞。處理方法一般來說就是按照方法配制培養(yǎng)基，或是直接購買所養(yǎng)細胞專用的培養(yǎng)基。
二、細菌、支原體、真菌等污染：雖然現(xiàn)在培養(yǎng)基里面一般都會添加雙抗(和)，但是如果無菌操作觀念不強，依然很有可能導致污染。處理方法：如果有凍存的細胞，就可以把污染的細胞丟棄處理，當然，丟棄不是隨意扔進垃圾桶就可以了，要按照實驗室生物安全規(guī)范操作進行。然后重新復蘇培養(yǎng)，建議把培養(yǎng)箱進行全面的消毒處理。若是沒有凍存，而這種細胞又是很珍貴的，常見的處理方法就是藥物處理：細菌污染加5-10倍的抗生素；真菌污染就加抗真菌藥物；支原體污染就加抗支原體藥物，具體藥物可以咨詢相關公司的技術支持，他們會比較專業(yè)。
三、很多細胞的生長存在密度依賴性，如果傳代后，細胞的密度太小，也是會影響到細胞生長的。這個時候沒什么特別好的處理辦法，只得勤換液。如果細胞培養(yǎng)瓶使用的是T75倒可以消化、離心、重懸，然后接種到T25的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
四、凍存細胞DMSO(二甲基亞砜)加的量不正確，沒有逐步梯度降溫。下次復蘇后的細胞總是長不好。處理方法：按照的凍存方式配制凍存液。有的細胞適合10%的DMSO，有的細胞適合5%；嚴格遵守逐步梯度降溫原則，細胞復蘇時快速解凍。
五、換液間隔時間太長，有的小伙伴養(yǎng)細胞真的很“佛系”，想起了就去換個液，信奉一句話“你已經(jīng)是成熟的細胞了，應該學著自己覓食，成長”。這種情況下細胞培養(yǎng)瓶中就會積累很多細胞代謝廢物，影響細胞活性。建議：勤換液
六、細胞“消化”時間過長，對細胞造成損傷；另外中一般會添加EDTA，螯合鈣離子，影響細胞貼壁。處理方法：控制好細胞“消化”時間，盡量去除干凈和其中的EDTA.
七、PH：細胞需要在一定的PH值下生長，這個道理小伙伴們都懂。但是很多時候PH都是我們忽略的，也是小編今天要強調(diào)的一點。我們使用的培養(yǎng)基可能會隨著使用時間的加長而緩慢變堿哦！(當然，也有可能會變酸，但常見的是變堿)，一般來說，過堿的培養(yǎng)基會影響到細胞生長。處理方法：簡單的就是換新鮮培養(yǎng)基唄！當然，如果有時間和有條件也可以調(diào)一調(diào)培養(yǎng)基的PH值。
