上海博湖生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒 |
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公司信息
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- 郵編:
- 200000
- 個(gè)性化:
- www.shbhbio-e.com
參考價(jià) | ¥780 |
-
型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷(xiāo)商 -
所在地
上海市
80T(50 μl 體系) | 780元 | 15 盒 可售 |
更新時(shí)間:2023-11-09 14:34:24瀏覽次數(shù):690
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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
商品屬性
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 |
P-PR1271 | RAPA3G動(dòng)物組織直擴(kuò)PCR試劑盒 | 80T(50 μl 體系) |
RAPA3G DNA 聚合酶為經(jīng)電子重構(gòu)架的第三代 Taq DNA 聚合酶,第三代 DNA 聚合酶具有高度的雜質(zhì)耐受性、 長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力、高擴(kuò)增成功率、高產(chǎn)量,這些特點(diǎn)使得 RAPA3G 系列產(chǎn)品可用于粗制樣品的直接擴(kuò)增,無(wú)需核酸純 化步驟。該 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、5’-3’的外切 酶活性、3’-5’的外切酶活性,產(chǎn)物部分帶有"A“尾巴,部 分為平末端,因此產(chǎn)物可用于 TA 克隆或平端克隆。
特點(diǎn)和用途:
(1)高雜質(zhì)耐受性:該 PCR Mix 可直接使用血液、蛋白含量較高的動(dòng)物組織材料進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,無(wú)需基因組提取。
(2)高效的快速 DNA 釋放劑:盡管該 PCR Mix 可以直接使用組織細(xì)胞材料進(jìn)行擴(kuò)增,但我們?nèi)匀煌扑]采用 DNA 釋放劑進(jìn)行樣本的快速前處理(約需要 5min,可高通量操作)。DNA 釋放劑的前處理,使得制備的 DNA 模板可以進(jìn)行多次、多基因擴(kuò)增,并長(zhǎng)期保存 DNA,經(jīng) DNA 釋放劑處理的樣本,在室溫條件下放置 1 個(gè)月,無(wú)任何后續(xù)影響,-20 可長(zhǎng)期保存。
(3)快速 PCR:該酶具有 6kb/min 以上的擴(kuò)增速度,可顯著的縮短 PCR 的擴(kuò)增時(shí)間,在常規(guī)測(cè)試條件下,10s 的延伸時(shí)間可完成 1kb 的基因組 DNA 擴(kuò)增。
(4)粗制樣品的擴(kuò)增能力:擴(kuò)增能力>4kb。
(5)高保真性能:該制品包含一定比例的 RAPA HiFi 超保真 DNA 聚合酶,因此其具有一定的保真性能(經(jīng)藍(lán)白斑測(cè)試,其保真性能約為 Taq DNA 聚合酶的 56 倍)。
(6)熱啟動(dòng),防止非特異性擴(kuò)增:RAPA3G 系列產(chǎn)品均采用 專(zhuān)有的熱啟動(dòng)技術(shù),確保 50 度以下無(wú)活性,僅有 95 度加熱 5min 以后才能恢復(fù)其活性,因此可限度的提高擴(kuò)增的特異性,減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。
包裝:
2×RAPA3G PCR Mix (with Dye) 1ml×2
快速 DNA 釋放劑 A 20 ml
快速 DNA 釋放劑 B 20 ml
儲(chǔ)存:長(zhǎng)期儲(chǔ)存置于-20°C 以下,可保存 2 年;短期使用置于 4°C(3 個(gè)月)保存。
使用方法
1. DNA 釋放
(1)采用加熱法:取 2-10 個(gè)毛發(fā)囊、1-10mg 動(dòng)物組織等材料,放入到 0.2ml EP 管中,加入 50 μl 快速 DNA 釋放劑A,于 PCR 儀中 98°C 加熱 5min,加熱完畢后加入 50 μl快速 DNA 釋放劑 B,混合均勻,即可使用。
(2)采用鋼珠研磨法:取 1-10mg 動(dòng)物組織等材料,放入到 2ml EP 管中,加入 250 μl 快速 DNA 釋放劑 A 和 2-3 粒鋼珠,研磨 1-2min 成漿體裝。研磨完畢后加入 250 μl 快速DNA 釋放劑 B,混合均勻,即可使用。
2. 按下表配制 PCR 反應(yīng)體系并混合均勻:
2×RAPA3G PCR Mix (with Dye) 25 μl
上游引物(10 μM) 2 μl
下游引物(10 μM) 2 μl
步驟 1 制備的模板 DNA 2 μl
ddH2O 19 μl
注意:當(dāng)擴(kuò)增片段>5kb 時(shí),引物用量調(diào)整為 0.25-0.5μl。
3. PCR 擴(kuò)增循環(huán)參數(shù)
循環(huán)數(shù) 溫度 時(shí)間
預(yù)變性 95°C 5min
25-40 Cycles
95°C 20s
50~60°C 20s
72°C 4-6kb/min
末延伸 72°C 2min
請(qǐng)注意:(1)該制品為熱啟動(dòng)制品預(yù)變性步驟 5min 不可縮短,否則 DNA 聚合酶無(wú)法恢復(fù)活性。(2)當(dāng)擴(kuò)增片段<1kb時(shí),延伸時(shí)間使用 15s;擴(kuò)增片段 1-2kb 時(shí),延伸時(shí)間使用45s,擴(kuò)增片段 2-3kb 時(shí),延伸時(shí)間使用 1min,當(dāng)擴(kuò)增片段>3kb 時(shí),請(qǐng)按照 2kb/min 的延伸時(shí)間進(jìn)行設(shè)置。(3)盡管該酶具有 6kb/min 的延伸速度,但按照 2kb/min 設(shè)置延伸時(shí)間的條件下,能獲得的產(chǎn)量。
3. 注意事項(xiàng):(1) 當(dāng)模板 GC 含量>70%時(shí),請(qǐng)?zhí)砑?× Q-Solution。(2)當(dāng)采用全血、血漿等蛋白含量的樣本時(shí),擴(kuò)增完畢后可能會(huì)有變性的蛋白沉淀,請(qǐng)離心后再進(jìn)行點(diǎn)樣和電泳。
公司正在出售的產(chǎn)品:
α2-PI ELISA Kit | 豬螺桿菌PCR試劑盒 |
PROG ELISA Kit | A Disintegrin And Metalloprotease 15,ADAM15 ELISA Kit |
ZNF644 ELISA Kit | XC-chemokine receptor 1,XCR1 ELISA Kit |
5HT IgA ELISA Kit | 甲型流感()病毒H5N2亞型RT-PCR試劑盒 |
β-hexosaminidase ELISA Kit | 白芷探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒 |
5'-3'Exoribonuclease 1(XRN1)ELISA Kit | 牛細(xì)小病毒PCR試劑盒 |
αGAL ELISA Kit | 分歧巴貝斯蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
8-iso-PG ELISA Kit | 禽致病性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒 |
β-EP ELISA Kit | 豬偽狂犬/豬圓環(huán)2型/高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRV-gB/PCV-2/PRRSV-M)核suan檢測(cè)試劑盒(三重?zé)晒?/span>PCR法) |
ZNF644 ELISA Kit | 巴西副球孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
CT ELISA Kit | 巴西利什曼蟲(chóng) |
zinc transporter 6,ZnT6 ELISA Kit | 豬水皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
8-OHdG ELISA Kit | RAPA3G動(dòng)物組織直擴(kuò)PCR試劑盒sCD30L 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體ELISA檢測(cè)試劑盒 |
β-EP ELISA Kit | 205kDa核孔蛋白(NUP205)ELISA試劑盒 |
自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白1(NRAMP-1)ELISA試劑盒 | 26S PSM 人26S蛋白體ELISA檢測(cè)試劑盒 |