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上海博湖生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高密度脂蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒 |
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公司信息
- 聯(lián)系人：
- 陳經(jīng)理
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- 地址：
- 上海閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈B102
- 郵編：
- 200000
- 個(gè)性化：
- www.shbhbio-e.com
| 參考價(jià) | ￥468-￥3900 |
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型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 1ml | 468元 | 15 盒 可售 |
| 10ml | 3900元 | 15 盒 可售 |
更新時(shí)間：2023-11-09 15:25:52瀏覽次數(shù)：514
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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
商品屬性
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
P-PR1267 | 2XRAPA HiFi PCR Mix(with dye) | 1ml |
P-PR1267 | 2XRAPA HiFi PCR Mix(with dye) | 10ml |
產(chǎn)品介紹：
RAPA HiFi DNA 聚合酶，其來(lái)源于高保真 DNA 聚合 酶，并加入了增強(qiáng)的延伸結(jié)構(gòu)，使其具有超保真性能（~280 倍 Taq）、長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力、高產(chǎn)量。長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力，使用 該酶可輕松擴(kuò)增 8kb 的基因組 DNA、20kb 的λ DNA、8kb 的 cDNA。該酶具有 6kb/min 以上的延伸速度。該 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、強(qiáng) 3’-5’的外切酶活性，產(chǎn)物為平末 端。該制品中已經(jīng)含有溴酚藍(lán)染料，PCR 擴(kuò)增完畢后可直接 點(diǎn)樣于瓊脂糖凝膠，無(wú)需再加入 DNA Loading Buffer。
特點(diǎn)和用途
(1) 超保真擴(kuò)增：~280 倍 Taq 的保真性能，是載體構(gòu)建、點(diǎn)突變、NGS 模板擴(kuò)增、基因合成的用酶。
(2) 快速擴(kuò)增：具有 6kb/min 的擴(kuò)增能力。
(3) 長(zhǎng)片段擴(kuò)增：質(zhì)粒、λDNA 等簡(jiǎn)單模板可以有效擴(kuò)增>20 kb，基因組可以有效擴(kuò)增>8 kb，cDNA 可以有效擴(kuò)增>8kb。
儲(chǔ)存：長(zhǎng)期儲(chǔ)存置于-20°C 以下，可保存 2 年；短期使用置于 4°C（3 個(gè)月）保存。
使用方法
1. 按下表配制反應(yīng)體系并混合均勻：
2×RAPA HiFi PCR Mix 12.5 μl
上游引物(10 μM) 1 μl
下游引物(10 μM) 1 μl
模板 DNA 1-250 ng
ddH2O up to 25 μl
*模板 DNA 用量參數(shù)(25 μl 反應(yīng)體系)
5-250 ng Genomic DNA
0.1-10 ng Plasmid DNA
1-2 μl cDNA from RT reaction
2. PCR 擴(kuò)增循環(huán)參數(shù)
（1）擴(kuò)增片段<5kb 時(shí)采用如下程序
循環(huán)數(shù) 溫度 時(shí)間
1st Cycle 95°C 1min
25-35 Cycles
95°C 30s
50~60°C 30s
72°C 6kb/min
Last Cycle 72°C 2min
（2）擴(kuò)增片段>5kb 時(shí)采用如下程序
循環(huán)數(shù) 溫度 時(shí)間
1st Cycle 92°C 1min
25-35 Cycles
92°C 30s
50~60°C 30s
72°C 2-3kb/min
Last Cycle 72°C 2min
3. 電泳：1% 瓊脂糖凝膠電泳，上樣 5 μl，電泳結(jié)束在紫外燈下檢測(cè)條帶。
4. 注意事項(xiàng)：（1）當(dāng)模板 GC 含量>65%時(shí)，請(qǐng)?zhí)砑?br style="box-sizing: border-box; margin: 0px;"/>5× Q-Solution（Cat. No.: A3002）。（2）當(dāng)擴(kuò)增片段<1kb>5kb 時(shí)，按照2-3kb/min 的延伸時(shí)間進(jìn)行設(shè)置，能獲得更高的產(chǎn)量。（3）由于不同的 PCR 管其導(dǎo)熱性能有所不同，通常 PCR 采用25μl 體系可以獲得更高的產(chǎn)量。
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