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當(dāng)前位置:南京沃博生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>DNA-ExitusPlus™清除核酸污染
隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域越來越廣。PCR 技術(shù)具有操作方便、靈敏度高等優(yōu)點。但也正是由于其*的靈敏度,使得極其微量的污染便可造成假陽性結(jié)果。如何克服污染現(xiàn)已成為 PCR 檢測急需解決的問題。
傳統(tǒng)的 DNA 污染清除多通過修飾、酶解(如 DNase)或變性等幾種方式。實踐證明這些方式存在不能*破壞 DNA 分子、試劑具有腐蝕性和毒性等不足。
方式 | 原理 | 不足 |
修飾 | 標(biāo)記遺傳物質(zhì),阻止聚合酶與核酸的結(jié)合,從而抑制 DNA 擴(kuò)增。 | 這種標(biāo)記均為可逆反應(yīng),一旦發(fā)生去修飾反應(yīng)即可被 聚合酶結(jié)合;試劑可能具有腐蝕性。 |
酶解 | 酶可將長鏈的核酸分子降解成小片段。 | 降解的核酸中仍有大片段存在,具有完整的遺傳信息, 可通過 PCR 擴(kuò)增出完整的片段。 |
高壓變性 | 高壓可將核酸降解成 20~30bp 的小片段。 | 僅適用于耐高壓材料,更無法應(yīng)用實驗操作臺和大型 的實驗設(shè)備。 |
DNA-ExitusPlus™是一種無腐蝕、無致癌性的核酸(包括 DNA、RNA)清除溶液。該產(chǎn)品可斷裂雙鏈 DNA 并將其*降解,而且已降解的核酸片段不能被恢復(fù),從而*消除 PCR 過程中由于非目標(biāo) DNA 導(dǎo)致的假陽性擴(kuò)增。 DNA-ExitusPlus™特點:
溶液為非酶類試劑;
溶液中各組分具有協(xié)同促進(jìn)作用,可快速地、非序列
特異性地降解 DNA 及 RNA 污染;
所有組分可生物降解,無毒無害;
不含無機(jī)酸或堿性物質(zhì),不會對金屬形成腐蝕;
不含有機(jī)溶劑或揮發(fā)性物質(zhì);
升溫至 50°C 可提高反應(yīng)速度。
DNA-ExitusPlus™使用說明:1. 經(jīng) DNA-ExitusPlus™處理過的臺面無需再用滅菌水清洗,避免二次污染的發(fā)生。2. 溶液干燥后不再具有活性,不要通過延長時間來增強(qiáng)處理效果,對于嚴(yán)重污染區(qū)建議做多次處理。3. 溶液中添加了指示劑,干燥后呈紫色或藍(lán)色,可擦拭不會在器物表面留下痕跡。使用方法:實驗操作臺表面直接將 DNA-ExitusPlus™噴到操作臺表面作用10~15分鐘,無菌濕布擦拭后即可,無需用水沖洗。儀器表面用布或紙巾蘸取適量 DNAExitusPlus™擦拭儀器表面,充分作用后再用干凈濕布擦一遍即可。一些小的部件可在 DNA-ExitusPlus™中浸泡10min 左右,然后用清水沖洗、晾干。塑料及玻璃器皿向容器中加入足量的 DNA-ExitusPlus™,搖晃以確保器皿內(nèi)壁全部接觸到溶液,充分作用后棄去溶液晾干,用蒸餾水沖洗干凈晾干即可。移液器遵照移液器說明拆取移液器的管嘴連件,于 DNA-ExitusPlus™中浸泡1min,然后用清水沖洗干凈晾干便可安裝到移液器上。解剖刀、鑷子等實驗器材先用蘸有 DNA-ExitusPlus™的布擦拭一遍,然后將鑷子等器材于 DNA-ExitusPlus™中浸泡10min 以上,也可通過加熱到50~60℃縮短處理時間。
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