使用說明：

轉(zhuǎn)膜前的準備：5-6張裁好的濾紙；裁好的轉(zhuǎn)印膜；足夠的1×超快轉(zhuǎn)移buffer

一、濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）

1、配制1×超快轉(zhuǎn)膜液。

1升1×Western超快轉(zhuǎn)膜液：取50ml 20×超快轉(zhuǎn)膜液，加入750ml雙蒸水，混勻之后加入200ml甲醇，混勻即可?，F(xiàn)配現(xiàn)用，配好后置于冰上存放。

2、將濾紙和海綿浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中，*浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快

轉(zhuǎn)膜液中。

注意：在使用6%或8%分離膠轉(zhuǎn)移大分子蛋白時，應(yīng)該降低甲醇含量至10%，以獲得更好轉(zhuǎn)移效果。

4、按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)。

二、半干轉(zhuǎn)（Semi-dry blot）

2、將濾紙浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中，*浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快

轉(zhuǎn)膜液中。

注意：水中漂洗時間一定不能超過2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能*轉(zhuǎn)移

三、轉(zhuǎn)移條件

1、濕轉(zhuǎn)

 推薦使用恒流轉(zhuǎn)移，電流可設(shè)置350-400mA，轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多，可以承受大電流，并且發(fā)熱量較低。

注：不推薦使用恒壓轉(zhuǎn)移，因轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多，當電壓在100v左右時，電流會達到400mA，此時已達到普通電泳儀器zui大電流，隨著時間延長，可能無法達到穩(wěn)定的100v電壓。

2、半干轉(zhuǎn)