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需要danguchun來建立和維持細(xì)胞膜。它在生理溫度范圍內(nèi)調(diào)節(jié)膜的流動性。 danguchun也是合成weishengsuD和類固醇激素（包括腎上腺激素pizhichun和醛固酮以及性激素，雌激素及其衍生物）的重要前體分子。該Amplite™danguchun定量分析試劑盒提供了zui靈敏的danguchun定量方法之一。該試劑盒使用Amplite™Red定量danguchun的濃度，這與danguchun存在時(shí)danguchun氧化酶介導(dǎo)的酶偶聯(lián)反應(yīng)中過氧化氫的產(chǎn)生有關(guān)。danguchun的量與在酶偶聯(lián)反應(yīng)循環(huán)中形成的過氧化氫的濃度成比例。在存在過氧化物酶的情況下，Amplite™Red的熒光強(qiáng)度與過氧化氫的濃度成比例，而過氧化氫的濃度則轉(zhuǎn)換為danguchun的濃度。該測定可以容易地用熒光酶標(biāo)儀讀取。
| 熒光酶標(biāo)儀 | |
| 激發(fā) | 540納米 |
| 發(fā)射 | 590納米 |
| 隔斷 | 570納米 |
| 推薦板 | 純黑色 |
| 成分A：Amplite™紅色（光敏） | 1個(gè)小瓶 |
| 組分B：測定緩沖液 | 1瓶（20毫升） |
| 組分C：danguchun酶混合物（凍干） | 2瓶 |
| 組分D：danguchun標(biāo)準(zhǔn) | 1個(gè)樣品瓶（2 mM，100 µL） |
| 成分E：DMSO | 1小瓶（200 µL） |
準(zhǔn)備danguchun測定工作溶液（50 µL）
添加danguchun標(biāo)準(zhǔn)品和/或測試樣品（50 µL）
在37°C孵育30分鐘
監(jiān)測Ex / Em = 540/590 nm時(shí)的熒光強(qiáng)度
重要 開始實(shí)驗(yàn)之前，請?jiān)谑覝叵陆鈨鏊性噭┖薪M件。
庫存解決方案的準(zhǔn)備
除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1. Amplite™Red儲備液（250X）
在Amplite™Red底物（組分A）的小瓶中加入40 µL DMSO（組分E）。儲備溶液應(yīng)及時(shí)使用。應(yīng)將所有剩余的溶液等分，并在-20 o C 重新冷凍。
注意避免重復(fù)凍融循環(huán)。
注意 在硫醇（例如二硫蘇糖醇（DTT））存在下，Amplite™Red底物不穩(wěn)定。反應(yīng)中DTT的終濃度應(yīng)不高于10 µM。Amplite™Red底物在高pH（> 8.5）下也不穩(wěn)定。因此，反應(yīng)應(yīng)在pH 7-8下進(jìn)行。建議使用提供的測定緩沖液（pH 7.4）。
2danguchun標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（20 µM）
將10 µLdanguchun標(biāo)準(zhǔn)品（組分D）添加到990 µL測定緩沖液（組分B）中，并充分混合。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
danguchun標(biāo)準(zhǔn)
準(zhǔn)備danguchun標(biāo)準(zhǔn)液（20 µM）。然后在測定緩沖液（組分B）中進(jìn)行1：3系列稀釋，以得到大約10、3、1、0.3、0.1、0.03和0.01 µM系列稀釋的danguchun標(biāo)準(zhǔn)品。包括非danguchun緩沖液對照作為空白對照。
準(zhǔn)備工作解決方案
danguchun測定工作溶液
將5 mL測定緩沖液（組分B）添加到danguchun酶混合物（組分C）的瓶中，并充分混合。將20 µL的Amplite Red™儲備溶液（250X）加入danguchun酶混合瓶中。
| 40004 | Amplite™比色法葡萄糖定量試劑盒 | Amplite™ Colorimetric Glucose Quantitation Kit | 500 Tests |
| 40005 | Amplite™熒光法葡萄糖定量試劑盒 | Amplite™ Fluorimetric Glucose Quantitation Kit | 500 Tests |
| 40006 | Amplite™danguchun定量試劑盒 | Amplite™ Cholesterol Quantitation Kit | 1 kit |
