XL1-Blue 電擊感受態(tài)細(xì)胞只能用于電擊轉(zhuǎn)化，不能用于熱激轉(zhuǎn)化。XL1-Blue菌株能保證高拷貝質(zhì)粒穩(wěn)定復(fù)制，recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA 的提取。hsdR17突變導(dǎo)致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失，增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。lacIqZAM15的存在使XL1-Blue菌株可用于藍(lán)、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素抗性。XL1-Blue電擊感受態(tài)細(xì)胞適用于各種文庫(kù)構(gòu)建，經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1x10"cfu/μg DNA。

基因型為:recAl endA1 gyrA96thi-1 hsdR17 supE44 (r,mk), relA1 lac [F' proABlacIZ A M15: Tn10 (Tet)]

操作方法:

1.0.1cm 電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,使乙醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。

2.取-80℃保存的XL1-Blue電擊感受態(tài)細(xì)胞插入冰中5分鐘,待其融化,加入目的DNA(質(zhì)?；蜻B接

產(chǎn)物)并用手bodaEP管底輕輕混勻,避免產(chǎn)生氣泡,立即插入冰中。

A.測(cè)定轉(zhuǎn)化效率使用1μl 10pg/μl 的對(duì)照質(zhì)粒pUC19;

B.對(duì)于連接產(chǎn)物,請(qǐng)用乙醇沉淀DNA后