本產(chǎn)品是基于ELISA夾心法用于外泌體定性定量的檢測(cè)試劑盒,利用高性能CD9捕獲抗體和CD81檢測(cè)抗體可以靈敏地檢測(cè)共表達(dá)外泌體表面標(biāo)記的CD9和CD81靶標(biāo)。本產(chǎn)品可適用于人體體液、細(xì)胞培養(yǎng)液等多種樣本,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)原始樣本中的外泌體進(jìn)行快速精準(zhǔn)定量。
產(chǎn)品組分及儲(chǔ)存條件
名稱 | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 |
捕獲抗體包被板 | 96 T | 2-8 ℃ |
Exosomes標(biāo)準(zhǔn)品 | 1 mL*5瓶 | -20 ℃ |
酶標(biāo)記物 | 10 mL | 2-8 ℃ |
顯色液A | 6 mL | 2-8 ℃ |
顯色液B | 6 mL | 2-8 ℃ |
終止液 | 6 mL | 2-8 ℃ |
濃縮洗液(20X) | 30 mL/瓶 | 2-8 ℃ |
稀釋液 | 5mL | 2-8 ℃ |
有效期:產(chǎn)品有效期為1年
檢驗(yàn)流程
1、檢測(cè)前準(zhǔn)備工作
①所有試劑應(yīng)在使用前室溫平衡至少15min。
②取濃縮洗液(20X),用蒸餾水或去離子水將20X濃縮洗液稀釋成1X工作液,混勻備用。
(試劑盒提供稀釋液,可自行用高濃度標(biāo)準(zhǔn)品稀釋使用)
2、操作步驟
①準(zhǔn)備已平衡好的板條和試劑,試劑充分搖勻。
②微孔板中分別加入各濃度Exosomes標(biāo)準(zhǔn)品以及待測(cè)樣本(100μL/孔)。
③用封板膜封住反應(yīng)孔,于37℃恒溫條件下,避光孵育60min。
④孵育結(jié)束后,加入工作液洗液清洗3次,每次200-250μL/孔,洗板結(jié)束后在吸水紙上拍干。
⑤每孔加入100μL酶標(biāo)記物,用封板膜封住反應(yīng)孔,于37℃恒溫條件下,避光孵育60 min。
⑥孵育結(jié)束后,加入工作液洗液清洗3次,每次200-250μL/孔,洗板結(jié)束后在吸水紙上拍干。
⑦配置顯色底物工作液:將顯色液A和B等比例混合得顯色底物工作液(請(qǐng)配置完2 min 內(nèi)使用)。
⑧各反應(yīng)孔加入100μL顯色底物液工作液,37℃恒溫條件下避光反應(yīng)30分鐘。
⑨各反應(yīng)孔加入50μL終止液,混勻后即刻測(cè)量OD450值(3min 內(nèi)),并繪制XY線性曲線。
3、校準(zhǔn)程序
采用XY線性擬合,確保線性相關(guān)系數(shù)R2≥0.99,每次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),必須進(jìn)行完整的校準(zhǔn)品操作,以繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
校準(zhǔn)點(diǎn) | S1 | S2 | S3 | S4 | S5 |
濃度:ng/ml | 0 | 7.816 | 15.625 | 31.25 | 45 |
OD450 | 0.0737 | 0.3074 | 0.5183 | 0.8618 | 1.2945 |
注意:本圖僅供參考,應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中的Exosome的含量。
注意事項(xiàng)
1. 本試劑盒需避光保存。
2. 本品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。